单核细胞趋化蛋白1与子宫内膜异位症相关性研究.docVIP

单核细胞趋化蛋白1与子宫内膜异位症相关性研究 【摘要】目的通过研究子宫内膜异位症(EM)患者血清、腹腔液及异位内膜组织中单核细胞趋化蛋白1（MCP1）水平的表达，探讨MCP1在子宫内膜异位症发病中的作用。方法病例组选取诊断为EM的不孕症患者45例，以酶联免疫吸附测定法( ELISA)定量检测EM患者血清及腹腔液中MCP1的水平；用免疫组织化学方法测定异位内膜组织中MCP1的表达。对照组选取其他原因不孕症患者45例，比较2组MCP1水平。结果EM组早期患者血清、腹腔液及异位内膜组织中MCP1水平明显高于晚期患者及对照组,差异有统计学意义(P0.05)；EM患者血清、腹腔液及异位内膜中MCP1水平明显高于对照组(P0.05)。结论EM患者血清、腹腔液及内膜组织中MCP1水平明显升高,提示MCP1在EM致病机制中起着一定作用。 【关键词】 子宫内膜异位症；单核细胞趋化蛋白1 【中图分类号】 R 【文献标识码】 A 【文章编号】 1002-7386（2010）19-2722-02 子宫内膜异位症(EM)是育龄女性常见疾病，也是常见的不孕症原因。近几年对单核细胞趋化蛋白1（MCP1）在EM的发病机制中的作用作了许多研究，但结论并不一致 。我们于2008年7月至2010年1月采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和免疫组织化学方法检测EM和非EM患者血清、腹腔液及异位内膜组织中MCP1的浓度,旨在探讨MCP1在EM发病中的作用。 1 资料与方法 1.1 一般资料 病例组选取我院经腹腔镜诊断为EM的患者共45例，采用修订后的美国生育协会EM分期评分法(RAFS)［1］对EM进行分期: 早期（Ⅰ～Ⅱ期）26例, 晚期(Ⅲ～Ⅳ期）19例。年龄26～41岁，平均年龄（34±7）岁；月经周期平均（30±5） d。对照组选取其他原因不孕症患者45例。年龄25～40岁，平均年龄（34±6）岁；月经周期平均（30±5） d。两组年龄、月经周期比较差异无统计学意义（P＞0.05）。2组均经术后病理检查确诊,术前3个月未使用激素类药物,无盆腔炎症、无自身免疫异常、无其他内、外科疾病。 1.2 方法 1.2.1 标本采集：术前空腹抽取肘部静脉血3 ml，术中吸取腹腔液5 ml，置于无菌离心管中,室温下静置1 h,2 500 r/ min 离心30 min,取上清液于-20℃冰箱中保存待测。病例组取卵巢巧克力囊肿的囊壁组织，经病理组织学确诊，显微镜下可见到异位内膜组织；对照组取其宫腔内膜。 1.2.2 测定方法：采用ABSELISA 法定量检测血清及腹腔液中MCP1水平。人MCP1 ELISA 试剂盒(德国RD公司产品) 由深圳晶美生物工程有限公司提供。操作方法严格按照试剂盒说明进行。用Biocell22010 型酶标仪(澳大利亚生产) 读取数据。采用免疫组织化学方法检测异位内膜组织中MCP1的表达。新鲜取材的异位内膜及子宫内膜均经10%甲醛固定，常规石蜡包埋。兔抗人MCP1多克隆抗体、即用型免疫组化SABC试剂盒及DAB显色剂均购自武汉博士德生物工程有限公司。严格按照说明书操作，并用磷酸盐缓冲液代替一抗做阴性对照。阳性染色为细胞浆中出现棕黄色颗粒。应用自动图像分析系统对免疫组织化学结果进行半定量分析。 1.3 统计学分析 应用SPSS 11.5统计软件。计量资料±s表示, 采取t检验,P0.05 为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 2组血清与腹腔液中MCP1浓度检测结果比较 病例组MCP1浓度较对照组明显升高（P0.05）。病例组早期患者MCP1浓度较晚期患者明显升高（P0.05）。 表1 2组血清与腹腔液中MCP1浓度比较±s,ng/L 组别血清MCP1腹腔液MCP1 病例组（n=45）212±42*32±8* 早期（n=26）232±45*#39±8*# 晚期（n=19）185± 14#26±3* 对照组（n=45）159±9 9±5 注：与对照组比较，*P0.05；与晚期组比较,#P0.05 2.2 2组异位内膜组织MCP1表达检测结果比较 病例组MCP1表达较对照组明显增强（P0.05）。病例组早期患者MCP1表达较对照组增强（P0.05）。 表2 2组异位内膜组织MCP1表达（平均光密度值 ）±s 组别MCP1表达 病例组（n=45）0.27±0.02# 早期（n=26）0.28±0.03#* 晚期（n=19）0.23±0.02# 对照组（n=45）0.19±0.19 注：与对照组比较，*P0.05；与晚期组比较,*P0.05. 3 讨论 EM发病机制尚不确切, 经血逆流被认为是成因之一。近年来, EM 患者免疫功能异常日益受到重视, 其中 EM 患者腹腔液及外周