复方邻苯二甲醛研制杀菌效果观察_Image_Marked.pdfVIP

复方邻苯二甲醛的研制及杀菌效果观察 中文摘要 【目的】 为改善邻苯二甲醛杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢的性能，开展复方邻苯 二甲醛的研究与配制，并进一步研究该复方消毒剂的杀菌性能、稳定性、pH 值对其杀芽孢效果的影响、初步探讨其毒性及杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢的 作用机理。 【方法】 1实验方法 采用正交试验表L9(34)以邻苯二甲醛(OPA)、苯扎溴铵配制复方邻 苯二甲醛消毒剂，以枯草杆菌黑色变种芽孢为正交试验的实验菌株，考察各 配方邻苯二甲醛杀芽孢效果的差异，筛选出合适的复方邻苯二甲醛。进一步 采用加速老化法进行复方邻苯二甲醛的稳定性试验：以枯草杆菌黑色变种芽 孢、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌为实验菌株对 复方邻苯二甲醛进行中和剂鉴定试验、pH值影响试验、悬液定量杀菌试验 及连续使用稳定性试验；并进行小鼠急性经口毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红 细胞微核试验：通过透射电镜观察复方邻苯二甲醛作用后枯草杆菌黑色变种 芽孢的超微结构变化，初步探讨作用机理。 2统计方法 悬液定量杀菌试验中，以点计数法计数对照组和实验组的存活菌落数， 分别进行对数转换后，两者相减，计算对数降低值。采用SPSSl2．0软件， 对筛选复方邻苯二甲醛的『F交试验数据采用正交设计的方差分析、复方邻苯 二甲醛杀菌性能的比较用重复测量设计的方差分析：对小鼠骨髓嗜多染红细 胞微核试验结果的比较与分析采用Poisson分布的统计学检验。 【结果】 1筛选复方邻苯二甲醛的正交试验 通过诈交试验，经方差分析表明邻苯二甲醛和苯扎溴铵可协同杀灭枯草 铵和5000mg／L邻苯二甲+4000mg／L苯扎溴铵都具有较好的杀芽孢活性， 前者组合最佳，后者次之。但考虑邻苯二甲醛的溶解度和性价比等因素，最 节溶液pH值达到了更好的杀芽孢效果，完全可以符合实际应用要求。 2复方邻苯二甲醛的稳定性 将复方邻苯二甲醛原液置54C恒温箱内放置14d，有效成分含量下降率 为2．03％。 3复方邻苯二甲醛杀菌性能的研究 3．1pit值影响试验 枯草杆菌黑色变种芽孢60min，平均杀灭对数值分别为O．20、3．86、6．73。 3．2复方邻苯二甲醛杀灭细菌繁殖体及白色念珠菌试验 含OPA rain 50mg／L、25mg／L、12．5mg／L的复方邻苯二甲醛溶液作用3 对金黄色葡萄球菌的平均杀灭对数值分别为6．34、3．76、O．79：对铜绿假单 胞菌的平均杀灭对数值分别为5．56、3．22、0．44；对大肠杆菌的平均杀灭对 数值分别为6．37、2．08、1．73：对白色念珠菌的平均杀灭对数值分别为7．24、 4．28、2．04。 3．3复方邻苯二甲醛连续使用稳定性试验 用含OPA 5000mg／L复方邻苯二甲醛溶液在自然室温条件下(15士2。C) 浸泡医疗器械，取其浸泡液作医疗器械模拟现场灭菌试验，作用至第21天 仍无菌生长，达灭菌要求。 4复方邻苯二甲醛的毒理学试验 验用各剂量组诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率与阴性对照组差异无统计 学意义(P0。05)。 5复方邻苯二甲醛对枯草杆菌黑色变种芽孢作用机理的超微结构观察 通过透射电镜观察，含OPA 8．3)作用 5000mg／L复方邻苯二甲醛(pH 30min后，大多数芽孢表现为形状不规则，外壳电子密度深浅不均、厚薄不 一，甚至部分缺损，皮质电子透明区扩大或界限不清，核心区偏位或结构松 散，出现电子透明区。 【结论】 通过『F交试验筛选出复方邻苯二甲醛溶液，该溶液在室温下可密闭保存 8．3条件下，复方邻苯二甲醛具有快速、高效 至少1年，经试验证明：在pH 的杀菌活性，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、 枯草杆菌黑色变种芽孢均有良好的杀灭作用；用于医疗器械灭菌过程，在室 温下(15士2。C)至少可连续使用21d；无毒、无染色体毒性：经透射电镜观 察，可使枯草杆菌黑色变种芽孢外壳受损，内容物漏出，提示芽孢结构已受 到破坏。 【关键词】复方邻苯二甲醛正交试验枯草杆菌黑色变种芽孢金黄色