沙眼衣原体检测讲解课件.pptxVIP

生殖道沙眼衣原体感染的实验室诊断朱参胜陕西省地方病防治研究所陕西省皮肤性病防治所 陕西西安CT感染的发病机理、基因型别以及临床表现CT细胞内寄生，细胞内的网状体复制形态，细胞外的原体有感染性原体内化后定位于包涵体内，防止被溶酶体融合免疫反应相关的炎性反应通常不十分明显，多数表现为隐性感染CT诱导多种防御机制的修改和破坏，引起CT持续感染基因型A-C是眼部感染基因型D-K引起泌尿生殖道、直肠、咽喉和眼结膜感染，围产期孕妇感染CT可引起新生儿结膜炎、咽喉炎和肺炎多数直肠、咽喉感染，以及下生殖道感染均不表现出临床症状 女性CT感染下生殖道后，通过上行至上生殖道，可诱导慢性感染，导致盆腔炎，引起宫外孕和输卵管因素不孕不育症许多国家采取筛查措施，通过定期检测发现无症状的感染者，并治疗感染者和性伴基因型A-K感染通常局限于黏膜上皮而基因型L1、L2和L3则穿过上皮，通过淋巴扩散，引起侵袭性感染，称为性病淋巴肉芽肿（LGV)LGV存在于非洲、亚洲、南美和加勒比海部分地区的地方性疾病男男人群中，已经发生了数起基因型L2的爆发生殖道沙眼衣原体感染特点病原体检测: 镜检, 培养抗原检测:快速, EIA核酸检测: PCR高流行无症状感染严重并发症依赖实验室诊断生殖道沙眼衣原体感染特点感染后：约70％女性和50％男性为无症状86％的女性和55％的男性感染者持续感染时间为1年以上。 不寻求治疗…….生殖道沙眼衣原体感染特点近年来研究： 引起活动性关节炎，与动脉硬化、冠心病有关 与HIV感染的促进作用 沙眼衣原体感染已成为全世界范围的公共卫生问题!生殖道沙眼衣原体实验室检测方法3.核酸检测： PCR (Roche), LCR ( Abbott), SDA (ProbeTec BD), TMA (Aptima Gene Probe) 荧光-PCR1.免疫学方法（抗原检测） ELISA 免疫荧光法（IFA） 胶体金法2.细胞培养法标本的采集（同淋球菌培养标本的采集）男性患者尿道 用男用取材拭子插入尿道 2～3cm，稍用力转动，保留数秒钟再取出， 以采集到粘膜上皮细胞。女性患者尿道 用同男性相似的上述方法取材。标本的采集（同淋球菌培养标本的采集）宫颈 仔细检查阴道壁和宫颈，如果宫颈口外面的分泌物较多，先用无菌棉拭清除过多的宫颈粘液。将一取样拭子插入宫颈管内1～2cm，稍用力转动，保留10～30秒后取出。直肠 将取样拭子插入肛门2～3cm，从紧靠肛环边的隐窝中取材。避免接触粪便。酶联免疫吸附试验（ELISA） 原理：Ab－Ag－Ab-酶 －底物－显色方法：加入标本（孵育后洗板） 酶标抗体（孵育后洗板） 底 物（孵育） 终止液－判读结果。 酶联免疫吸附试验（ELISA）结果判读cutoff＝阴性对照＋？阳性：OD the cutoff value灰区（Gray Zone）: 略低于 the cutoff阴性：低于灰区酶联免疫吸附试验（ELISA）结果判读阳性结果的确证2002年美国 CDC推荐：所有非培养阳性结果应用另一种方法确证为真正阳性。EIA 阳性：可进一步将样本进行DFA、“blocking” assay 或基因诊断确证。酶联免疫吸附试验（ELISA）评 价敏感性和特异性与直接免疫荧光法相似 敏感性：79－97％ 高 特异性: 97－99％ 高试验结果阴性时，不能完全排除沙眼衣原体感染，有可能是沙眼衣原体数量不足或标本采集不当的缘故酶联免疫吸附试验（ELISA）优 点快速、方便自动化程度高，可同时检测大批量标本结果判断客观性强缺 点在低感染率的人群中敏感性差与其它微生物可有交叉反应，出现假阳性结果酶联免疫吸附试验（ELISA）临床应用 适宜用于检测沙眼衣原体高流行率的人群 临床和健康体检 沙眼衣原体感染的筛查抗原快速检测 1.原理： 2.方法：拭子＋I液－80℃10分－冷5分－滴加5滴－15分读结果 抗原快速检测结果判断阳性标本在结果窗见一条细线。另外，无论标本为阳性或阴性，都应在质控窗显示一条细线，表明试剂质量合格，试验步骤正确抗原快速检测优 点简易，方便，快速，尤其适用于基层单位缺 点标本中需要足够数量的沙眼衣原体抗原，否则有假阴性结果结论：女性尿道拭子：敏感性32.8%, 特异性99.2% 女性宫颈拭子：敏感性49.7%,特异性97.9% 结果显示特异性较好，而较低的敏感性，提示有较高的漏检率。 沙眼衣原体快速检测方法的评价沙眼衣原体快速检测试剂的现场评估标本男性尿道拭子宫颈拭子阴道拭子特异性93.5%97.8%99.2%敏感性50%49.7%32.8%试剂1试剂2核酸扩增技术标 本敏感性（％）特异性（％）男性尿道98.0100.0男性尿液93.599.8女性宫颈94.499.9女性尿液95.7