物理化学实验邻二氮菲分光光度法测定铁含量讲解材料.pptVIP

邻二氮菲分光光度法测定铁含量;;; 根据所用光源波长的不同，分光光度法可分为：可见分光光度法（380-760 nm）、紫外分光光度法（200-380 nm）和红外分光光度法（780-300000 nm）。; 当光照射到某物质或某溶液时，组成物质的分子、原子或离子与光子发生“碰撞”，由于分子、原子或离子的能级是量子化的，不连续的，只有光子的能量(hν)与被照射物质粒子的基态和激发态能量之差(ΔE) 相等时，才能被吸收。——物质对光的吸收。;物质的吸收光谱;不同浓度的同一物质，在某一波长下吸光度A有差异，在λmax处吸光度A差异最大。浓度越大，吸光度越大，此特性可以作为物质的定量分析的依据。 在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。;;根据Lambert-Beer定律数学表达式： A = εbc b—液层厚度（光程长度，cm） c—是溶液的物质的量浓度 ε—是摩尔吸光系数（单位为L·mol-1·cm-1），与入射光波长及物质本性有关 若溶液组成量度以质量浓度(g·L-1)表示， 数学表达式还可以表示为：A =abc，式中a为吸光系数（单位为L·g-1·cm-1）。; 在分光光度法中，当条件一定时，吸光系数（ ε、a ）均为常数，此时溶液的吸光度（A）与有色物质的浓度成正比。 ;A标 = abc标;五、分光光度计使用方法;五、分光光度计使用方法;722s可见分光光度计预热20分钟以上。（接通电源-左侧面长方形按钮为开关，开启进行预热） 机器调零：开盖调零模式，按以下步骤操作： 将样品池盖子打开-（面板上）“模式”按键调到透射比-“0%”按键（透射率为零）,调零工作结束。 如果没有进行测试，样品池盖子一定处于开盖状态！！;测试样品步骤：（整个过程样品池盖关闭） 空白样品调零：1号溶液为空白样品（1号溶液透光率为100%），利用拉杆（轻轻调节拉杆即可）使光路对准空白样品进行调零， “模式”按键调到透射比-“100%”按键（光全部通过1号溶液，相当于将背景吸光度扣除掉） 注意：只要波长λ有变动，就要进行1号空白样品调零操作 调零结束后，进入吸光度模式，就可以将样品调到与光路对应位置进行吸光度测试。读取吸光度数值、记录。 注意：一定要耐心等待约1分钟左右，读数稳定后才可按动按键进行0%或100%调节操作！！;邻二氮菲（邻菲罗啉）是目前分光光度法测定铁含量的较好试剂，在pH=3~9的溶液中，试剂与Fe2+生成稳定的橙红色配合物该显色反应中铁必须是亚铁状态，因此，在显色前要加入还原剂，如盐酸羟胺，反应如下： ;表5-1 标准溶液和待测溶液配制;选择最大吸收光波长λmax为入射光波长，以试剂空白作为参比溶液，测出所配系列标准溶液的吸光度：;（1）绘制吸收光谱并确定λmax：根据表5-2所记录的数据，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标在坐标纸上绘制吸收光谱，从而找出测量用的最大吸收波长λmax。 吸收光谱：（附图） （2）绘制标准曲线：根据表5-1所记录的数据，以标准Fe2+离子的浓度（μmol·L-1）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标绘制浓度对吸光度的标准曲线。 标准曲线：（附图） ;（3）待测溶液中Fe3+（或Fe2+）离子浓度的确定：根据所测的待测溶液的吸光度，利用比较法和标准曲线法分别计算出原未知溶液Fe3+（或Fe2+）浓度（mg·L-1）。 标准曲线：（附图） 1）标准曲线法： 标准曲线上直接读出Fe2+的含量为＿＿＿（mg·L-1）； 原水样中铁离子含量为＿＿＿＿＿＿（mg·L-1）。 2）比较法： 所选取Fe2+标准溶液的吸光度＿＿＿＿＿＿； 水样的吸光度＿＿＿＿＿＿＿＿＿； 原水样中铁离子含量为＿＿＿＿＿＿（mg·L-1）。 ;;注意吸量管上“吹或快”字;