核酸分解及核苷酸代谢a2.pptxVIP

Ⅰ.核酸的分解（水解）碱基与戊糖的N-糖苷键磷酸之间的3,5 -磷酸二酯键化学键1.酸水解最不稳定顺序DNA嘌呤糖苷键﹤嘧啶糖苷键﹤磷酸酯键DNA：pH 1.6于37℃透析即可完全除去嘌呤； pH 2.8于100℃加热1 h，也可除去嘌呤无嘌呤酸2.碱水解最不稳定顺序RNA二酯键﹤ DNA二酯键﹤糖苷键2-核苷酸和3-核苷酸少量核苷2, 5-和3, 5-核苷二磷酸水解产物RNA碱稳定，稀碱只变性，不水解！无2-OH，故不形成2, 3-环核苷酸中间物！l mol/L NaOH中100℃4 h，得寡聚脱氧核苷酸！DNA3.酶水解 非特异性水解磷酸二酯键，无碱基专一性磷酸二酯酶核酸酶专一水解核酸的酶，有碱基专一性。分解部位：小肠、十二指肠吸收部位：小肠粘膜 部位⑴核酸外切酶exonuclease 从核酸末端开始逐个水解出核苷酸的核酸水解酶。概念牛脾磷酸二酯酶5端开始，产生3-核苷酸蛇毒磷酸二酯酶3端开始，产生5-核苷酸⑵核酸内切酶endonuclease 从核酸内部开始，有一定专一性切点的核酸水解酶。概念①核糖核酸酶类 A.牛胰核糖核酸酶（RNaseⅠ，EC 2.7.7.16）提取牛胰性质最适pH为7.0~8.2，耐热，可人工合成。3-嘧啶核苷酸；或3-嘧啶核苷酸结尾的寡核苷酸。产物例题B.核糖核酸酶T1（ribonuclease T1，EC 3.1.4.8）性质耐热，耐酸；专一性较高3-鸟苷酸为末端的寡核苷酸或3-鸟苷酸产物C.核糖核酸酶T2（RNase T2，EC 2.7.7.17)Ap残基tRNA可形成3-腺苷酸结尾的寡核苷酸 切点②脱氧核糖核酸酶类 A.牛胰脱氧核糖核酸酶DNaseⅠ，EC3.1.4.5名称底物双链或单链DNA5-磷酸结的寡聚核苷酸平均长度4个核苷酸。 产物B.牛脾脱氧核糖核酸酶名称DNaseⅡ，EC 3.1.4.6最适pH 4~5，0.3 mol/L Na+激活，Mg2+抑制！条件3-磷酸末端的寡聚核苷酸平均长度为6个核苷酸。产物C.链球菌脱氧核糖核酸酶5-磷酸为末端的碎片长度不定条件产物最适pH=7。 RNase：酶稳定、耐高温DNase：种类多、工具酶特征⑶限制性内切酶restriction endonuclease概念细菌中存在的降解外源DNA的核酸水解酶。有4~6对碱基序列的专一性，中心点互补对称大多数产生粘末端。特点可能是细菌的免疫防御，抵抗外来分子侵袭，相当于免疫细胞。适应 限制性内切酶是分子生物学研究的重要工具酶属名＋种名＋株名+类别命名Eco RⅠE： 大肠杆菌（Escherichia coli）的属名co： 种名的头两个字母R： 菌株、变种、品种Ⅰ：酶类别Ⅰ类：内切、修饰，识别与切割位点不一致Ⅱ类：识别与切割位点统一Ⅲ类：切割方式基本同Ⅱ类是否斜体？Ⅱ.核苷酸的降解 1.核苷酸的水解核苷酸+H2O→核苷+磷酸名称：总称磷酸单酯酶， 2，3，5-Pi存在：广泛存在核苷酸酶：水解3，5-Pi 的磷酸单酯酶！酶核苷+磷酸←→碱基+戊糖-1-磷酸核苷磷酸化酶存在广泛，反应可逆。 核苷+H2O→碱基+戊糖名称：核苷酶或核苷水解酶作用：植物和微生物，只水解核糖核苷酶2.嘌呤的分解嘌呤分解产物尿酸人类、灵长类、爬行类、鸟类尿素鱼类、两栖类、人类（少）鱼类、两栖动物、海洋无脊椎动物氨大量存在代谢中产物如尿囊素和尿囊酸等植物氨、二氧化碳、有机酸（甲酸、乙酸、乳酸等） 微生物尿酸生成人体嘌呤代谢部位主要肝脏、小肠、肾脏核酸大量分解（白血病、恶性肿瘤等）或食入高嘌呤食物，血中尿酸＞0.48mmol/L异常症状关节炎、尿路结石及肾疾（痛风）尿酸成盐结晶，沉积于关节、软组织、软骨及肾等原因别嘌呤醇，结构似次黄嘌呤抑制黄嘌呤氧化酶！治疗3.嘧啶的分解6C75NCN1C8CC2N94N3Ⅲ.核苷酸的合成 1.嘌呤核糖核苷酸的合成N1 ： 天冬氨酸 C2、C8 ：一碳单位C3、N9 ：谷氨酰胺C4、C5、N7：甘氨酸 C6 ：CO2⑴次黄嘌呤核苷酸的合成羽田杀菌素（Asp的类似物）GTP GDP+Pi延胡索酸+AMP IMP + Asp腺苷酸琥珀酸合成酶腺苷酸琥珀酸裂解酶⑵腺嘌呤核苷酸的合成名称：N-羟-N-甲酰甘氨酸，hadacidin结构：类似天冬酰胺作用：抑制腺苷酸琥珀酸合成酶的活性， 阻止腺苷酸琥珀酸的生成， 阻止核酸合成，抗癌！结果：未用于临床，对肝、肾的毒副作用大羽田杀菌素NADNADH2谷氨酰胺谷氨酸 XMP GMPIMP①②H2OATP AMP+PPi⑶鸟嘌呤核苷酸的合成 黄嘌呤核苷酸经氨基化成鸟嘌呤核苷酸。①次黄嘌呤核苷酸脱氢酶②鸟嘌呤核苷酸合成酶细菌：自由氨动物：谷氨酰胺氨基来源⑷由嘌呤碱和核苷合成核苷酸（补救途径）salvage pathway