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细胞凋亡与胎盘 免疫学杂志 1999年第2期第15卷 综述与讲座 作者：李东至　林其德 单位：上海第二医科大学附属仁济医院妇产科 上海200001 CELL DEATH AND PLACENTA 　　细胞凋亡是细胞主动的死亡过程，是与细胞坏死截然不同的一种细胞死亡方式。自1972年Kerr提出这一概念以来，已认识到细胞凋亡是属于机体的生理机制,是多细胞生物更新正常细胞和清除异常细胞的重要手段，参与机体生殖、胚胎发育、免疫等生理过程以及肿瘤、病毒感染等疾病发生过程。目前已揭示出在细胞凋亡过程中，细胞内部发生一系列特殊基因的表达及生化和形态学改变。本文仅就人胎盘中的细胞凋亡作一综述。 　　1　细胞凋亡概述 　　1.1　细胞凋亡的形态学特点及其检测　细胞凋亡存在着特征性变化，包括细胞缩小，微绒毛消失，胞浆浓缩，核质致密并分离、呈新月形边集，核膜皱折、起泡或出芽，进而细胞裂解，形成凋亡小体，最终被巨噬细胞或临近实质细胞吞噬而清除。整个细胞凋亡过程不伴炎症反应。形态学判定是凋亡检测的经典方法，是其它各种检测方法的基础。光镜和透射电镜观察、流式细胞技术也越来越多地用于细胞凋亡的检测，其优势在于对细胞群中凋亡细胞进行快速计数。但如果只想证实细胞群中存在凋亡细胞，可用凝胶电泳，在电泳带表现为特征性梯形带即可确定研究的细胞群体中出现凋亡细胞。最常用的细胞凋亡检测方法为TUNEL法（TdT-mediated dUTP nick end-labeling），可特异性地、原位地显示凋亡细胞，且在一般组织切片中进行，操作简单，使凋亡原位检测在基础与临床的研究中得到广泛的应用。 　　1.2　细胞凋亡的诱导基因与抑制基因　近年来，对蛋白质、RNA合成的抑制剂如放线菌酮和放线菌素D的研究证实，大分子合成是凋亡细胞较为普遍的反应［1］；新的蛋白质合成被看作是凋亡的一个重要特征，提示：凋亡是内在基因编码的主动程序性死亡，这种由遗传因素决定的细胞凋亡基因称为死亡基因。生理条件下，细胞协调激活凋亡诱导基因和凋亡抑制基因共同控制着细胞凋亡过程，维持细胞内环境的动态平衡。细胞凋亡诱导基因目前研究较多的有c-myc、野生型p53、Apo-1／Fas和ICE基因。癌基因c-myc对细胞增殖、分化以及死亡起着双向调节作用。Myc蛋白与致癌因素等刺激同时存在时，细胞表现为增殖效应；若细胞同时接受了某些抑癌基因的刺激信号，过度表达的Myc蛋白则激活某些基因转录，产生促凋亡因子，诱导细胞发生凋亡［2，3］。p53基因可分为野生型和突变型，二者对细胞凋亡的作用相反。野生型p53为一种抑癌基因，在人类大多数肿瘤中都存在不同程度的缺失或突变。其主要作用是维持遗传物质的完整性，阻止受损伤的DNA进入细胞周期而进行修复；如损伤不可逆转，则p53启动一系列酶解过程，引导细胞凋亡［4］。另一类与凋亡相关的基因为凋亡抑制基因，包括bcl-2家族、突变型p53、RB基因等。bcl-2家簇在体内通过形成多种同源或异源二聚体而发挥调控细胞死亡的作用。bcl-2原癌基因是目前最受关注的与凋亡相关的基因之一，其对细胞增殖速度无影响，也与蛋白质合成无关，其抗凋亡作用在于阻断凋亡细胞内部的信号传导［5，6］。值得强调的是，调节细胞凋亡的基因很多，不断还有新的基因发现，细胞凋亡往往不是单个基因作用的结果，而是在不同刺激信号影响下涉及多个基因表达及相互作用的复杂过程［7］。 　　2　胎盘组织中细胞凋亡研究 　　2.1　胎盘细胞凋亡的观察　细胞凋亡的研究几乎遍及人体的各个组织，尤以在肿瘤研究中的地位最为突出，已成为判断肿瘤预后和指导治疗的重要依据。胎盘的细胞凋亡研究近来才受到重视。胎盘是母儿间的物质交换器官，它的完整性对维持妊娠有重要作用。Nelson等［8］注意到正常足月胎盘合体滋养层局部缺失是一个常见的组织学特性，缺失处有纤维素沉积，他推测是由合体滋养细胞凋亡造成的，附着的纤维素提供上皮再生的支架。取纤维素沉积处的胎盘组织在电镜下观察，发现合体滋养细胞具有凋亡细胞的超微结构改变［9，10］。用凝胶电泳法检测正常足月胎盘DNA，出现典型的梯形带［11］，表明细胞凋亡存在于胎盘组织为一生理现象。Smith等［12］在这方面作了详细的工作，他们用光镜、电镜及TUNEL法全面观察了正常早孕和晚期胎盘中的细胞凋亡，并对凋亡细胞进行鉴别。结果表明，胎盘中大部分凋亡细胞（＞50％）为滋养细胞，内皮细胞较少（＜5％），其余为间质细胞。光镜下早期胎盘凋亡细胞的比例占有核细胞总数的0.07％，晚期为0.14％，二者差异显著。TUNEL法计数的结果比光镜高，几乎是后者的两倍，可能此法比较敏感，能检出形态学上尚无法辨认的凋亡细胞。但是采用TUNEL法有一点值得注意，当绒毛发生水肿变性或凝固性坏死时，细胞核可呈阳性［13］。 　　2.2