陕西师范大学有机化学实验14-纸色谱和薄层色谱.pptVIP

装置图 薄层色谱 纸色谱 五.??注意事项 薄层板制备好之后，一定要进行活化，除去水分。 点样时要注意样点直径要不超过2mm。点几个样点间隔应1—1.5㎝。一次点样若不够，可点几次，但要等溶剂挥发后再点下一次，防止量多出现拖尾现象。 所用滤纸应质地均匀平整 且实验中手不要触及滤纸的表面，以免污染。 避免两条滤纸在大试管中碰一起，切勿将样点浸入展开剂中。 若溶质展开后较分散,则选取其最高浓度中心。 在向滤纸喷洒茚三酮时，要以雾状喷洒，不能有液滴在其表面凝集，更不能有液滴在其表面流动，以免影响展开效果。 六.思考题 1. 如何利用Rf值来鉴定化合物? 2. 在混合物薄层色谱中,如何判定各组分在薄层上的位置? 3. 展开剂的高度若超过了点样线,对薄层色谱有何影响? 4. 纸上层析属于吸附色谱还是分配色谱? 邓字巍 Email: zwdeng@snnu.edu.cn Tel纸色谱和薄层色谱 * 一. 实验目的 * 1.了解用色谱法定性分析及提纯化合物的原理。 2.熟悉并掌握薄层色谱及纸色谱的基本操作。 * 二.色谱基本原理介绍 色谱法（Chromatography）亦称“色谱分析”“色谱分析法”和“层析法等。是一种分离、纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一。 色谱法的基本原理：是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能(分配)的不同，或其亲和性的差异，使混合物的溶液（流动相）流经该种固定物质（固定相）,进行反复的吸附或分配的作用,从而使各组分分离。 色谱法分析中，流动的混合物溶液称为流动相；固定的物质称为固定相。 * 分类 * * 色谱法在有机化学中的应用 鉴定化合物：在条件完全一致的情况，纯粹的化合物在薄层色谱或纸色谱中都呈现一定的移动距离，称比移值（Rf值），所以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。 跟踪一些化学反应进程：可以利用薄层色谱或纸色谱观察原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否。 分离混合物：一些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的混合物，一般应用化学方法分离很困难，但应用色谱法分离，有时可得到满意的结果。 精制提纯化合物： 有机化合物中含有少量结构类似的杂质，不易除去，可利用色谱法分离以除去杂质，得到纯品。 * 薄层色谱 薄层色谱又叫薄板层析，是色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸附色谱。按其作用机理可以分为吸附薄层层析,分配薄层层析等。 薄层色谱特点 * * 薄层色谱的操作 * * * * * 薄层板的制备 * * * * * 2mm 1cm 2mm * * （五）展开 展开槽 展开方式 * 薄层色谱示意图 点样及展开注意事项 软板点样需很轻，否则固定相会粘到点样管下方。 一根点样管只能点一种样品，否则有交叉污染。 样品点直径应不超过2 mm，距离薄层板底部约1 cm，样品点之间间距约1~1.5 cm，展开时薄层板底部浸入展开剂的高度约0.5 cm。注意样品点决不能浸到展开剂中。 一次点样若不够，可点几次，但要等溶剂挥发后再点下一次，防止量多出现拖尾现象 展开剂离薄层板上缘约1 cm时应停止走板，取出晾干。不可使展开剂走到板的尽头。板取出后要及时标记展开剂前沿，否则展开剂挥发后难以确定。 * 样品本身有色可以直接观察到分离过程，无色化合物需要显色。 显色剂的选择。 碘熏显色，紫外灯显色，喷显色剂 六.显色与定位 * 纸色谱法 纸色谱是以滤纸为载体的色谱法 * 三.实验试剂和仪器 1%偶氮苯的苯溶液，1%苏丹III的苯溶液，1%的羧甲基纤维素钠（ＣＭＣ）的水溶液，硅胶Ｇ，9：1的无水苯-乙酸乙酯。研钵一个，台秤，载玻片（7.5*2.5cm）5片，烘箱一个，广口瓶一个。 甘氨酸、亮氨酸的水溶液，两种氨基酸各取等体积组成混合液，展开剂为5：4：1的水-正丁醇-冰醋酸（体积比），2%的茚三酮乙醇溶液。大试管一支，滤纸（2*15cm）,喷雾器一支，电吹风一把，毛细管（口径1mm）若干支，直尺一把，铅笔一支 四．操作步骤 （一）薄层色谱 偶氮苯和苏丹III的分离 ??? (1)薄层板制备：将硅胶G和CMC溶液调成均匀的糊状，用滴管涂于洁净的载玻片上，取下涂好薄层板，置水平桌面上于室温下晾干，在110℃烘60分钟。置于干燥箱中留以备用。 (2)?点样：距底边1cm处划一横线作为起始线，点样直径不应超过2mm，点间距离约为1.8 cm，点样时必须注意勿损伤薄层表面。样品溶液的含水量越小越好，样品溶液含水量大，点样斑点扩散大，像降落伞。取三块分别点样试剂为偶氮苯和混合液，混合液和苏丹III，偶氮苯和苏丹III (3)展开：广口瓶需预先用展开剂（9：1的无水苯-乙酸乙酯）饱和，将