脊髓星形胶质细胞通过il-6参与慢性痛调节的研究-study on the involvement of spinal astrocytes in chronic pain regulation through il - 6.docx

目录中文摘要1英文摘要4英文缩写6研究论文脊髓星形胶质细胞通过IL-6参与慢性痛调节的研究引言7第一部分脊髓星形胶质细胞参与CFA引起的炎性痛的机制前言8材料与方法9结果11附图12附表13讨论14小结15参考文献16第二部分脊髓背角星形胶质细胞在脊神经结扎模型引起的神经病理性痛中的作用前言18材料与方法19结果21附图22附表23讨论24小结25参考文献26第三部分脊髓IL-6在脊神经结扎模型所引起的热痛敏中的作用前言28材料与方法29结果31附图32讨论33小结35参考文献36结论38综述疼痛解剖与生理基础39致谢52个人简历53脊髓星形胶质细胞通过IL-6参与慢性痛调节的研究摘要慢性痛和急性痛是疼痛的两大类，其中急性痛一般具有对机体的提醒和保护作用，而慢性痛多是病理性的疼痛。慢性痛的形成及发展的机制还不完全清楚，外周及中枢神经系统都参与其中并发挥作用。在以前的研究中已经指出，胶质细胞参与了慢性痛形成和发展的过程。星形胶质细胞被广泛激活，上调某些炎性介质和细胞因子，进而使之与神经元表面相应受体结合，增强神经元兴奋性，参与疼痛发展与维持过程。本研究采用脊神经结扎（SpinalNerveLigation,SNL）大鼠以及足底给予完全弗氏佐剂（CompleteFreund’sAdjuvant,CFA）大鼠来模拟临床上常见的神经病理性痛和炎性痛状态，观察脊髓星形胶质细胞及其释放的炎性介质是否参与了慢性痛中的形成和维持。目的：1观察脊髓星形胶质细胞在CFA引起的慢性炎性痛中所发挥的作用。2观察脊髓星形胶质细胞在SNL引起的神经病理性痛中是否发挥作用。3观察脊髓背角白介素-6（Interleukin-6，IL-6）在大鼠SNL诱导的神经病理性痛中所发挥的效果。方法：1将18只SD大鼠分为3组（6只/组）：CFA组（大鼠右足底注射CFA后鞘内置管术，6d后，鞘内注射生理盐水）；L-α-aminoadipat（eLAA）组（注射CFA后行鞘内插管，6d后，鞘内注射LAA）；对照组（右后肢足底注射生理盐水）。术前及术后7d观察各组机械性缩足反应潜伏期(pawwithdrawalmechanicalthreshold,PWML)及热刺激的缩足反应潜伏期（pawwithdrawalthermallatency,PWTL）。术后7d以Real-timePCR方法检测各组脊髓星形胶质细胞标记物GFAP的mRNA变化。2将24只大鼠分为4组（6只/组）：SNL模型组（于手术后7d鞘内给予生理盐水）；假手术组（未损伤脊神经）；L-α-aminoadipate（LAA）组（于SNL手术后7d鞘内给予LAA）；对照组（不进行处理）。术前及术后7d观察大鼠对机械性缩足反应潜伏期及热刺激的缩足反应潜伏期阈值。术后7d以Real-timePCR方法检测脊髓GFAP的mRNA变化。320只大鼠随机被分4组（5只/组）：假手术3d组、假手术7d组、SNL术后3d组、SNL术后7d组。行脊神经结扎手术建立大鼠SNL模型，用ELISA方法检测脊髓背角中IL-6的含量。大鼠鞘内给药，分别给予IL-6和IL-6的中和抗体，观察SNL大鼠对于热刺激的缩足反应潜伏期。结果：1注射药物前各组动物的机械性及热痛敏无明显改变（P0.05）。术后7d，与对照组相比，CFA组机械性痛敏阈值及PWTL显著下降（P0.01），脊髓GFAP的mRNA水平显著提高（P0.01）；LAA组大鼠脊髓背角GFAPmRNA与CFA组相比显著下降（P0.01），大鼠机械性痛敏阈值和PWTL均显著提高（P0.01）；2术前各组机械性及热痛敏无统计学改变（P0.05）。术后7d假手术组动物机械性及热痛敏无统计学差异，大鼠脊髓GFAP的mRNA水平也无显著差异（P0.05）；与对照大鼠相比，SNL大鼠机械痛及热痛阈显著下降（P0.05），大鼠脊髓背角GFAPmRNA水平显著提高（P0.05）；相比SNL大鼠，LAA大鼠机械性痛阈和PWTL均显著提高（P0.05），脊髓中GFAPmRNA水平显著下降（P0.05）；3术后3d和7d，SNL大鼠脊髓IL-6显著增多（P0.05）。SNL后7d给予IL-6未能引起假手术组的PWTL的显著改变。与注射生理盐水的SNL组相比，注射外源性IL-6的SNL大鼠PWTL显著减低（P0.05）。SNL后7d给予IL-6中和抗体，未能观察到假手术组PWTL的变化。但是，给予IL-6中和抗体的SNL组PWTL比给予生理盐水的SNL组显著提高（P0.05）。结论：1脊髓星形胶质细胞的活化可能在CFA大鼠炎性痛的发生发展中起到效果。2位于SNL大鼠脊髓的胶质细胞被活化后，在此种慢性痛中发挥促伤害性作用。3脊髓的IL-6在大鼠SNL模型所诱发的神经病理性痛中的作用是促伤害性作用。关键词：神