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加减温经汤对寒凝血瘀大鼠卵巢hoco系统及相关因素的影响-influence of modified wenjing decoction on hoco system and related factors in ovaries of rats with cold coagulation and blood stasis.docx

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加减温经汤对寒凝血瘀大鼠卵巢hoco系统及相关因素的影响-influence of modified wenjing decoction on hoco system and related factors in ovaries of rats with cold coagulation and blood stasis

中文摘要动,反应迟钝,爪尾部紫暗,耳色暗红,喜扎堆,呼吸微弱,被毛无光泽, 饮水量少,小便色清,大便溏泻等症状。治疗高、低剂量组上述症状很快 减轻,恢复正常,对照组大鼠上述症状有不同程度的改善。2阴道细胞涂片:各组大鼠阴道涂片均显示动情前期、动情期、动情 后期、动情间期规律的周期性变化。动情周期:正常组4-3±O.48 d,模型 组5.5±O.97 d,低剂量组5.1±1.1l d,高剂量组4_3±0.48 d,对照组5.2±O.92 d。间期:正常组1.3±O.48 d,模型组2.4±0.84 d,低剂量组1.7±0.67 d,高剂量组1.5±0.53 d,对照组2.1±0.57 d。其中模型组大鼠动 情周期延长,主要表现为问期延长,与正常组比较差异有显著性(P0.01); 经加减温经汤治疗,低剂量组大鼠动情间期与模型组比较有所缩短 (P0.05),高剂量组大鼠动情周期和动情间期与模型组比较皆有所缩短 (均PIO.01);高剂量组与低剂量组、对照组比较动情周期、动情间期皆 缩短,其差异有统计学意义(均P0.05)。3大鼠卵巢重量指数的变化:正常组34.63±4.25 mg/g,模型组31.72±4.07 mg儋,低剂量组31.37±2.93 mg/g,高剂量组32.88±4.85 mg旭, 对照组31.38±3.16 m∥g。各组大鼠卵巢重量指数之间差异无统计学意义。4大鼠卵巢组织形态学的改变:正常组大鼠卵巢形态正常,可见各期 卵泡及黄体组织;模型组卵巢可见各级卵泡但数量较少,未见成熟卵泡, 血管管径变细;低剂量组、高剂量组可见各级卵泡,血管基本正常;对照 组可见各级卵泡,但成熟卵泡较少。5大鼠血清E2、P、T、LH、FsH的含量变化 血清E2含量:正常组23.91±4.29 pg/m1,模型组15.94±3.79 pg/删,低剂量组20.20±3.07 pg/111l,高剂量组24.13±5.36 p∥m1,对照组20.11±3.44 pg/ml。血清P含量:正常组18.71±5.41 ng/ml,模型组10.41±2.89 n∥Inl,低剂量组15.89±4.56 ng/m1,高剂量组20.42±4.88 ng/Inl,对照组15.82±3.47 ng/m1。血清T含量:正常组14.75±6.57n∥d1,模型组7.74±2.63 n∥d1,低剂量组8.89±5.50 n∥d1,高剂量组14.42±6.01 n∥d1,对照组11.60±2.23ng/dl。血清LH含量:正常组4.60±O.83 InIu/m1,模型组2.78±O.45 1IlIu/咖,中文摘要低剂量组3.57±O.40“U/rnl,高剂量组4.05±0.72“U/ml,对照组3.87±0.66 mIU/m1。血清FsH含量:正常组1.43±0.21 mIu/m1,模型组1.06±O.32 伽U/n11,低剂量组1.11±0.39“U/m1,高剂量组1.60±O.31 mIU/m1,对 照组1.38±0.45Ⅱ1Iu/m1。模型组大鼠的血清E2、P、T、LH与正常组比较均明显降低(均 P0.01),血清FSH降低(尸0.05);经加减温经汤治疗,低剂量组血清 E2、P、LH均升高,与模型组比较差异有统计学意义(PO.05,P0.05, P|0.01),高剂量组血清E2、P、T、U{升高,与模型组比较差异有统计 学意义(均P:O.01),血清FSH升高(P‘=0.05);对照组E2、P、FSH升 高,与模型组比较差异有统计学意义(均P0.05),血清LH升高(P0.01); 高剂量组与低剂量组、对照组比较E2、P、T升高差异有统计学意义(均 PO.05)。第二部分Ho在寒凝血瘀大鼠卵巢中的表达及加减温经汤对其影响 方法: 实验动物分组、造模方法和给药方法同第一部分。于2周后选择动情问期称重后断头处死大鼠。取血O.1 mI,采用血红蛋白结合及联二亚硫酸 盐还原法测定血浆C0水平:溶血后加NaS204 25 mg,将血中多组分的血 红蛋白转化为Hb和c0Hb两个组分,在分光光度计上用420nm和432nm 两个波长比色,记录吸光度值,依比尔定律建立方程式,计算出COHb 的百分含量。迅速将卵巢组织置于4%多聚甲醛+O.1%DEPc溶液中固定,脱水、石 蜡包埋,制作4u m厚切片,采用免疫组织化学sP法检测卵巢组织HO一1、 HO一2蛋白表达。将石蜡包埋的卵巢组织标本,制作6 u m厚切片采用原 位杂交法检测卵巢组织H0.1、}IO.2 mRNA表达。用彩色病理图文分析 系统分析H0一l、HO.2在卵巢组织切片中表达的平均灰度,以代表阳性信 号的表达强度。最后进行组间比较。结果: l血浆c0Hb的测定结果:正常组1.01±O.14%,模型组0.56±

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