染色体制备及识别讲解课件.pptVIP

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2018-05-23 发布于浙江
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染色体制备及识别讲解课件.ppt

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人类淋巴细胞染色体制备、G显带及核型分析淋巴细胞染色体制备一、常用设备无菌工作台隔水式电热恒温培养箱电热式水浴箱电热干燥箱光学显微镜离心机二、常用试剂培养基（1640）新生小牛血清植物血球凝集素（PHA）双抗（青、链霉素）抗凝剂（肝素，EDTA）秋水仙碱（胺）甲醇、冰乙酸胰蛋白酶 Giemsa染液三、常用易耗品玻璃培养瓶刻度玻璃离心管翻口胶塞玻璃滴管载玻片四、细胞培养和G显带染色体制备 1 细胞培养 1640+10%牛血清+PHA 种全血0.5ml 37℃ 培养70h 加秋水仙碱 2h 2 染色体制备培养物离心（2000转/分钟）去上清加 0.075M KCL 低渗处理加1ml 3:1甲醇、冰乙酸离心甲醇、冰乙酸固定二次滴片 60 ℃烤片2h 3 G显带 0.025%胰蛋白酶染色体玻片处理30-90秒 2-5%Giemsa染色5-10分钟自来水蒸馏水冲洗干燥显微镜观察 4 染色体计数和核型分析染色体计数：一般情况下计数30个分裂相，遇嵌合体或性畸型时计数100个分裂相核型分析：一般分析3个分裂相 G显带染色体识别 * 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 X 20 21 22 Y *