第13章基因表达调控级唐旭东.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * 七、基因表达在翻译水平以及翻译后阶段仍然可以受到调节 （一）对翻译起始因子活性的调节主要通过磷酸化修饰进行（自学） （二）RNA结合蛋白参与了对翻译起始的调节 （自学） （三）对翻译产物水平及活性的调节可以快速调控基因表达（自学） 第64页/共70页 *一大家族小分子非编码单链RNA （四）小分子RNA对基因表达的调节十分复杂 1．微小RNA (microRNA, miRNA) *特点： 长度一般为20~25个碱基； 在不同生物体中普遍存在； 其序列在不同生物中具有一定的保守性； 具有明显的表达阶段特异性和组织特异性； miRNA 基因以单拷贝、多拷贝或基因簇等多种形式存在于基因组中，大多位于基因间隔区。 第65页/共70页 是细胞内一类双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)在特定情况下通过Dicer酶切机制，转变为具有特定长度(21~23个碱基)和特定序列的小片段RNA。 双链siRNA参与RNA干扰沉默复合体 （RNA interference silencing complex ，RISC）组成，与特异的靶mRNA完全互补结合，导致靶mRNA降解，阻断翻译过程。 由siRNA介导的基因表达抑制作用被称为RNA干涉或RNA干扰(RNA interference，RNAi)。 2．小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA) 第66页/共70页 30bp 双链RNA（dsRNA） 水解生成 21-23个碱基 siRNA 3’ 3’ 5’ 5’ RISC形成 识别特异序列 并使其降解 RNA干扰作用机制 Dicer酶 第67页/共70页 siRNA 和miRNA的相同点 非编码小分子RNA 由Dicer切割产生 长度22个碱基左右 与一些蛋白形成RISC复合体 与mRNA作用引起基因沉默 第68页/共70页 发育过程的调节 抑制转座子活性和病毒感染 生物学效应 不需完全互补 需完全互补 靶mRNA 结合 阻遏其翻译 降解mRNA 功能 单链分子 双链分子 结构 内源发夹环结构的转录产物 内源或外源长双链RNA诱导产生 前体 miRNA siRNA siRNA 和miRNA的差异比较 第69页/共70页 第70页/共70页 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * mRNA 阻遏蛋白 有乳糖存在时 I DNA Z Y A O P pol 启动转录 mRNA 乳糖 半乳糖 β-半乳糖苷酶 图13-4 lac 操纵子与阻遏蛋白的负性调节 第32页/共70页 + + + + 转录 无葡萄糖，cAMP浓度高时 有葡萄糖，cAMP浓度低时 2. CAP的正性调节 Z Y A O P DNA CAP CAP CAP CAP CAP CAP 第33页/共70页 3. 协调调节 ※当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用； ※如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。 *单纯乳糖存在时,细菌利用乳糖作碳源； *若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。 葡萄糖对 lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏(catabolic repression)。 第34页/共70页 细菌优先利用葡萄糖作为能源 有葡萄糖： cAMP 阻止cAMP 与CAP结合 CAP无活性 不促进转录 无葡萄糖： cAMP CAP有活性 促进转录 第35页/共70页 mRNA 低乳糖时 高乳糖时 葡萄糖低 cAMP浓度高 葡萄糖高cAMP浓度低 RNA-pol O O O O *lac操纵子强的诱导作用既需要乳糖存在又需缺乏葡萄糖 第36页/共70页 乳糖操纵子调控方式的比较 负调控 正调控 调节蛋白 阻遏蛋白 CAP 变构物 乳糖、半（别）乳糖 cAMP 与变构物结合 无活性 有活性 基因位点 O基因 CAP位点 结合于基因位点 基因关闭 基因开放 异丙基硫代半乳糖苷(IPTG) 第37页/共70页 三、原核生物具有不同的转录终止调节机制 1.不依赖Rho (ρ)因子的转录终止 两段富含GC的反向重复序列，中间间隔若干核苷酸； 下游含一系列T序列。 只需RNA聚合酶，不需其它蛋白质成分 *终止子结构特点： （一）大肠杆菌转录终