对药品研发影响及原始记录常见问题讨论 讲解材料.ppt

药典采用现代分析技术举例 柱串联技术 适用于溶解度无明显差异但电荷上有明显差异的难分离物质，通过将一根SCX（阳离子交换）短柱与一根MGⅡC18长柱串联就可以简单达到将其分离的目的。 原理：有电荷差异的被分离物质进入色谱柱串联系统后，带正电荷的物质（通常是碱性物质）会由于SCX短柱的离子交换作用而被保留在短柱中，而带负电荷的物质（通常为酸性物质）与中性物质则会毫无阻碍的通过短柱进入C18长柱中，从而成功分离；然后由于MGⅡC18长柱中疏水性基团间的相互作用而对中性物质有强保留作用，但对带负电荷物质无强保留作用，这样带负电荷物质与中性物质也简单被分开了 如果为了让峰形更好，各峰间分离更开，还可在阳离子交换短柱与C18长柱前接一根NH2短柱（它可与阴离子发生交换作用），进行三根串联，也可以使带负电荷的酸性物质与中性物质达到更好的分离效果。 药典采用现代分析技术举例 首次运用肽图分析技术： 根据蛋白质、多肽的分子量大小以及氨基酸组成特点，使用专一性较强的蛋白水解酶，一般为肽链内切酶，作用于特殊的肽链位点将多肽裂解成小片断，再通过一定的分离检测手段形成特征性指纹图谱，用此法进行鉴别，专属性强，可鉴别仅相差一个氨基酸残基的不同种属来源的样品。 如胰岛素-采用V8酶解+HPLC法； 重组人生长激素-采用胰蛋白酶酶解+HPLC法获得肽图进行鉴别等。 胰岛素肽图 人胰岛素酶解-HPLC肽图 猪胰岛素酶解-HPLC肽图 电泳法-等电聚焦水平板电泳法 琼脂糖凝胶电泳法 醋酸纤维素薄膜电泳法 纸电泳法 等点聚焦水平板电泳法 聚丙烯酰胺凝胶电泳法 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 典型的等电聚焦图谱 重组人生长激素（二部第566页）用此法做鉴别 纯化水、注射用水和灭菌注射用水的增修订 纯化水、注射用水的修订 增订： 电导率 氯化物 硫酸盐 钙盐 二氧化碳 总有机碳测定 易氧化物 药典中新检验技术的应用 药典附录通用检测方法变化提示 重金属检查法： 甲管（标准）＋乙管（供试品） +丙管（标准+供试品） 如丙管颜色浅于甲管则将一法改为二法进行检查 勘误！第二法规定乙管（标准）中显出的颜色与甲管（供试品）比较，不得更深。 附录通用检测方法中的变化提示 澄清度检查法： 增加“几乎澄清”的定义：0.5号～1号 溶液颜色检查法 恢复“无色或几乎无色”的定义 性状颜色描述与颜色检查项匹配：原有些液体制剂品种颜色检查项规定“与黄色2号标准比色液比较，不得更深”，但性状描述为“无色或几乎无色的澄明液体”，与附录定义不匹配，现修订为“无色至微黄色的澄明液体”。 本版药典中极个别品种仍然存在此问题！尼莫地平注射液 药典附录变化提示 －引湿性试验指导原则 重金属检查法： pH测定法： 不溶性微粒检查法： 可见异物检查法： 渗透压摩尔浓度： 2010年版 2005年版 （1）供试品 符合药品质量标准 （2）称量瓶 试验前一天置25±1℃ 80±2%环境中预引湿 （3）瓶盖同条件放置 （1）供试品 干燥失重或水分符 合限度要求 （2）称量瓶 没要求预引湿 （3）瓶盖 没提及 引湿性试验原始记录 -容易出现的错误 实验日期（全检合格之后） 实验时间（24小时） 实验温度、湿度 称量瓶提前放置记录 药典附录变化提示 －钠盐的鉴别反应 重金属检查法： pH测定法： 不溶性微粒检查法： 可见异物检查法： 渗透压摩尔浓度： 2010年版 2005年版 钠盐 （1）取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。 （2）取供试品约100mg，置10 ml试管中，加水2 ml溶解，加15%碳酸钾溶液2 ml，加热至沸，应不得有沉淀生成；加焦锑酸钾试液4 ml，加热至沸；置冰水中冷却，必要时，用玻棒摩擦试管内壁，应有致密的沉淀生成。 （替换使用醋酸氧铀锌试液的方法） （1）取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。 （2）取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试液，即生成黄色沉淀。 药典附录变化提示 －锌盐的鉴别反应 重金属检查法： pH测定法： 不溶性微粒检查法： 可见异物检查法： 渗透压摩尔浓度： 2010年版 2005年版 锌盐 （1）取供试品溶液，加亚铁氰化钾试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在稀盐酸中不溶解。 （2）取供试品溶液，制成中性或碱