chapter10细胞骨架课件.pptVIP

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* 微丝 微管 中间纤维 * * * * 鞭毛(flagella)运动和纤毛(cilia)运动 ·纤毛和鞭毛的运动形式 ·纤毛与鞭毛的结构 ·纤毛运动机制 三、中间纤维(intermediate filament,IF) 10nm纤维,因其直径介于肌粗丝和细丝之间, 故被命名为中间纤维。IF几乎分布于所有动物细胞,往往形成一个网络结构,特别是在需要承受机械压力的细胞中含量相当丰富。除了胞质中,在内核膜下的核纤层也属于IF。 ●中间纤维的装配 ●中间纤维的成分与分布 ●中间纤维结合蛋白( IFAP )及其判定标准 ●中间纤维的功能 中间纤维的装配 ◆中间纤维装配过程  ◆IF装配与MF,MT装配相比,有以下几个特点: ·IF装配的单体是纤维状蛋白(MF,MT的单体呈球形); ·反向平行的四聚体导致IF不具有极性; ·IF在体外装配时不需要核苷酸或结合蛋白的辅助, 在体内装配后,细胞中几乎不存在IF单体(但IF的存在 形式也可以受到细胞调节,如核纤层的装配与解聚)。 中间纤维的成分与分布 IF成分比MF,MT复杂,具有组织特异性。IF在形态上相似,而化学组成有明显的差别。 ◆中间纤维类型与分布 ◆中间纤维蛋白的表达具有严格的组织特异性 中间纤维分类与分布 中间纤维的功能 ◆增强细胞抗机械压力的能力 ◆角蛋白纤维参与桥粒的形成和维持 ◆结蛋白纤维是肌肉Z盘的重要结构组分,对于维持肌肉细胞的收缩装置起重要作用 ◆神经元纤维在神经细胞轴突运输中起作用 ◆参与传递细胞内机械的或分子的信息 ◆中间纤维与mRNA的运输有关 第二节 细胞核骨架 细胞核骨架是存在于真核细胞核内的以蛋白成分为主的纤维网架体系。广义的核骨架包括核基质、核纤层和核孔复合体。 ●核基质(Nuclear Matrix) ●染色体骨架 ●核纤层(Nuclear Lamina) 核基质(Nuclear Matrix) ●形态结构 ●成分 ●核骨架蛋白(MAR蛋白)及核骨架结合序列 ●功能 形态结构 研究核骨架的分级抽提方法 1、非离子去垢剂溶解膜结构系统,胞质中可溶性成分随之流失; 2、再用Tween40和脱氧胆酸钠处理,胞质中的微管、微丝与一些蛋白结构被溶去,胞质中只有中间纤维网能完好存留; 3、然后用核酸酶与0.25mol/L硫酸铵处理,染色质中DNA、RNA和组蛋白被抽提, 最终核内呈现一个精细发达的核骨架网络, 结合非树脂包埋-去包埋剂电镜制样方法,可清晰地显示核骨架-核纤层-中间纤维结构体系。 成 分 ◆核骨架不象胞质骨架那样由非常专一的蛋白成分组成,核骨架的成分比较复杂,主要成分是核骨架蛋白及核骨架结合蛋白,并含有少量RNA。 ◆核骨架蛋白 ◆骨架结合蛋白 ◆其它 核骨架结合序列 ◆ DNA序列中的核骨架结合序列(matrix associated region, MAR)这部分DNA与核骨架蛋白的结合不为高盐溶液抽提所破坏,在基因表达调控中有作用 ◆核骨架结合序列的基本特征 ◆ MAR的功能 ·通过与核骨架蛋白的结合,将DNA放射环锚定在核骨架上; ·作为许多功能性基因调控蛋白的结合位点。 核骨架结合序列的基本特征 ·富含AT ·富含DNA 解旋元件(DNA unwinding elements) ·富含反向重复序列(Inverted Repeats) ·含有转录因子结合位点。 功 能 ◆核骨架与DNA复制 ◆核骨架与基因表达 大量研究工作表明真核细胞中RNA的转录和加工均与核骨架有关。具有转录活性的基因是结合在核骨架上的; RNA聚合酶在核骨架上具有结合位点。 ◆核骨架与病毒复制 ◆核骨架与染色体构建 二、染色体骨架 ●染色体骨架/放射环模型 ●染色体骨架的真实性 ◆银染法能选择性地显示染色体轴结构 ◆DNA酶和RNA酶处理或用0.4mol/L H2SO4处理去除组蛋白,对染色体轴没有影响,用胰蛋白酶消化则染色体轴破坏,说明染色体轴是非组蛋白性的。 ◆染色体骨架/放射环模型在分子水平上得到两个直接证据 ●染色体骨架与染色体高级结构 三、核纤层(Nuclear Lamina) 核纤层是位于细胞内层核膜下的纤维蛋白片层或纤维网络。它与中间纤维、核骨架相互连接,是联系细胞核、质骨架的桥梁。 ●核纤层分布与形态结构 ●成分——核纤层蛋白 ●核纤层蛋白的分子结构及其与中间纤维蛋白的关系 ●核纤层蛋白在细胞分化中的表达 ●核纤层在细胞周期中的变化 ●功能 成分——

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