染料脱色菌的生理生化和遗传特性研究.pdfVIP

摘要 从被染料废水污染的土壤中筛选到的两株脱色优势菌 (ND1和ND2)，进行 了以下的研究: 利用CNDO/2量化程序，计算了数种典型偶氮染料ELUMO，并以脱色率为衡 量指标，采用逐步回归法进行QSBR研究，预测脱色率与实验结果十分吻合。 通过理论及对大量实验文献的剖析，进一步证实染料的脱色反应是影响染料生 物降解途径的限速步骤，从而确定脱色酶是控制染料降解反应的关键酶。 从碳源利用、好氧性试验、温度及pH值等方面考察NDI和ND2的基本生 理生化特性，探明了脱色菌的最适生长条件。在此基础上，以偶氮染料酸性橙11 及葱醒染料 KN-R为作用对象，测定菌株的脱色能力及环境因素对降解染料的 影响，结果表明ND1.ND2对作用染料均有较好的脱色效果，其温度的适应范 围较宽，pH的变化对菌株脱色影响较大。 通过质粒提取、检测，对脱色酶的基因进行初步定位，表明控制脱色酶的 基因位于质粒上，并经质粒转化得到了能稳定表达的转化子。 考察了NDI粗酶液的脱色特性及作用条件，并利用海藻酸钙包埋法将酶液 固定化，结果表明固定化酶具有作用迅速、对环境适应性强等优点。 关键词:染料脱色 优势菌 生理、遗传特性 ABSTRACT Twosuperiorstrains,ND1andND2，whichwereisolatedrfompollutedsoilbydyes, havebeenstudiedasfollowing: TheE,.MoofsometypicalazodyeswerecalculatedbyusingCNDO/2quantum chemistryprogram.Bychoosingdecolorizingrateasindex,theQSBRmodelwas studied,andthepredicteddecolorizingrateissimilartotheexperimentresult. Throughcombinetheoreticalanalysiswithexperimentalresults,ithasprovedthat decolorizingreactionisthecontrollingstepinthepathwayofdyedegradation,and thedecolorizingenzymeisthekeyenzymewhichlimitingthereactionspeed. ThecharacterizationofND1andND2wereinvestigatedfromtheimpactofcarbon source,aerobictest,temperatureandpHvalues,respectively.Theiroptimum conditionwerealsoobtained.Onthebasisofaboveconclusions,azodyeacidorange IIandanthraquinonedyeKNRwerechosenasobjectivecompoundstomeasurethe decolorizingabilityandtheimpactofenvironmentalfactors.Theresultsshowedthat NDIandND2decolorizeddyeseffectively. Byextractingandexaminingplasmid,itshowedthatthegenewhichencoding decolorizingenzymewaslocatedonplasmid,andthetransformantswereobtainedby plasmidtransforming. ThedecolorizingcharacterizationofND1scellextractwasstudied,andthecell extractwasimmobilized，theresultsshowedthatimmobilizingenzymehadsome advantages,suchasrapiddecolorization,goodadaptationforenvironment Keywords:dyedecolorization superiorstrains physiologicalandgenetic characterization 染料脱色菌的生理和遗传特性研究 1染料降解菌的特