自固化磷酸钙人工骨松质骨颗粒作骨髓间充质干细胞载体修复家兔股骨头缺血性坏死的实验研究.pdfVIP

中文摘要 24小时后手术植入实验动物股骨头钻孔处；B组则分别 浸润分成和CCPC一样大小的明胶海绵颗粒，放入细胞 培养箱内培养24小时后，手术将松质骨颗粒和载有 BMSCs的明胶海绵均匀混合并植入实验动物股骨头钻 孔处。3．实验动物模型制备及手术方法：所有动物双侧 股骨头都参加实验。取俯卧位，40mg／kg硫喷妥钠腹腔 注射麻醉。常规消毒，铺单。髋关节后侧切口，显露股 骨头，不切断圆韧带，髋关节不脱位，保护周围组织， 用液氮棉团连续冷冻股骨头3分钟造成股骨头坏死模 型。自然复温后从股骨颈内后侧向股骨头内钻孔，用直 径3．5mm钻头向股骨头内钻入4mm，到达关节软骨下。 钻孔后植入复合BMSCs的明胶海绵混合自体松质骨颗 粒，关闭伤口。4．HE染色：取出10％福尔马林中保存的 股骨头标本，从股骨颈基底锯断，将标本做标记后放入 8％甲酸溶液中换液三次，共脱钙两周。脱水、透明、浸 蜡、修块，做5pm切片，水浴，铺片，烤片。然后行 HE染色：熔蜡，酒精梯度水化，亚甲兰染色，酸化， 返兰，伊红染色，再酒精梯度脱水，透明。然后光学树 脂封片。5．X线及组织学观察：X射线观察钻孔区骨密 度及骨小梁的变化情况。苏木精．伊红染色切片，光镜观 察钻孔区细胞及骨小梁的变化情况。6．统计学方法：采 用SPSS11．5统计学软件，对缺损区新生骨小梁图像， 进行面积百分比均值的t检验分析。 结果：1．股骨头X线检查：A组2周标本，钻孔区 可见股骨头中部植入复合BMSCs的CCPC部位有明显 中文摘要 的高密度区，骨小梁结构完整。4周标本，钻孔区高密 度部分密度略减，钻孔区以外密度有所增加，骨小梁结 构完整。6周标本，内植CCPC部分密度仍略高，出现 骨小梁，钻孔区界限模糊，钻孔缺损区以外密度有所增 加，骨小梁紊乱，8周标本，内植CCPC部分密度基本 正常，出现骨小梁，钻孔区界限进一步模糊。钻孔缺损 区以外密度有所增加，骨小梁紊乱，出现软骨下囊性变。 B组2周标本钻孔区密度减低，钻孔区以外密度有所增 加，骨小梁结构完整。4周标本，钻孔区密度增高但仍 低于正常，钻孔区以外密度有所增加，骨小梁结构完整。 6周标本，钻孔区可见稀疏骨小梁，钻孔区以外密度增 加，骨小梁紊乱，出现软骨下囊性变。8周标本，钻孔 区密度基本正常，出现骨小梁，钻孔区界限模糊。钻孔 区以外密度有所增加，骨小梁紊乱，出现软骨下囊性变。 从总体上看，A组缺损区因植入完整的CCPC，故密度 逐渐降低最后出现正常骨小梁结构。B组缺损区植入明 胶海绵混合白体松质骨颗粒，密度由开始降低后升高， 最后出现正常骨小梁结构。2．股骨头的组织检查：A组 术后2周时，钻孔缺损区内有大量的成骨细胞，缺损区 边缘有较多的类骨质和新生骨小梁。4周时缺损区内有 大量骨小梁形成及类骨质填充。6周时缺损区内可见比 较成熟的骨小梁，并出现骨髓组织。在8周时缺损区内 骨小梁趋于成熟，并有大量骨髓组织形成。B组实验动 物的股骨头标本术后2周时，钻孔边缘形成较多新生骨 组织，新生骨内侧有一个成骨细胞聚集层，而钻孔区中 心充满了炎症细胞。4周时，钻空区新生骨小梁增多， 中文摘要 但并不在全部区域，部分标本在钻孔中央形成少量骨组 织，部分标本无骨组织形成。6周时现象与4周的情况 接近，只是骨小梁稍加成熟，有骨髓组织出现。钻孔区 有血管出现。8周时乍di：fL边缘区充满分布不均匀的骨小 梁组织和骨髓组织。 统计学分析：在术后8周时，两组实验动物股骨头钻 孔缺损区内，骨小梁的面积百分比值分别为，A组为 0．804650+0．002268 l，B组为0．801 统计学分析表明，具备方差齐性，总体无差别，两两比 较P=0．8420．05，无统计学意义。 结论：1．BMSCs复合CCPC有很好的成骨作用，无 细胞诱导因子亦可良好成骨；2．BMSCs复合CCPC修复 股骨头坏死效果等同于其复合白体松质骨；3．CCPC可 以作为BMSCs良好的支架材料。 关键词：股骨头缺血性坏死；自体松质骨颗粒；自 固化磷酸钙人工骨松质骨颗粒；自体；骨髓间充质干细 胞；支架材料，家兔 英文摘要 ofOiltreatment Experimentalstudy