(病原免疫实验课件)实验三免疫标记技术知识.ppt

实验三;（一）1、酶联免疫吸附试验（ELISA）;（一）免疫标记技术 【概念或原理】： 利用荧光素、酶、胶体金、发光物质以及放射性核素等易显示物（标记物）连接于已知抗体或抗原，再去检测待测标本中的相应抗原或抗体的量或其存在与否。 优点：高度的敏感性和特异性，简便、快速，可作定性、定量或定位测定。 【分类】 荧光免疫技术 酶免疫技术→ELISA（双抗体夹心法 ） 放射免疫技术 金免疫技术→斑点免疫层析试验 化学发光免疫技术等 ;;*;*; 酶免疫组化技术：组织（或细胞）中抗原定位 酶免疫测定(如ELISA)：测液体标本中抗原或抗体 ELISA (酶联免疫吸附试验，enzyme-linked immunosorbent assay) sandwich ELISA to detect Ag √ indirect ELISA to detect Ab competitive ELISA to detect Ag or Ab ; 1）已知抗体包被 2）洗板 3）加待检抗原标本 4）洗板 5）加酶标记抗体 6）洗板 7）加底物显色，测定 (measure color) ;（一）免疫标记技术 1、酶联免疫吸附试验 (ELISA) ------双抗体夹心法;（一）1、酶联免疫吸附试验（ELISA）;*;;（一）2、斑点免疫层析试验(dot gold immunochromatographic assay，DICA);*; ;*;（一）2、斑点免疫层析试验; （二）免疫细胞功能测定 1、E花环试验 原理： T细胞表面有绵羊红细胞受体（E受体）(CD2)，若T细胞与绵羊红细胞共同孵育，T细胞周围吸附绵羊红细胞，为花环形成细胞， 可用来鉴定和计数T细胞 ;; ; ;rosette forming cell;rosette forming cell;rosette forming cells;rosette forming cell (electron microscope); ;（二）2、淋巴细胞转化试验; ; ;;转化的淋巴细胞包括以下三种细胞： （1）淋巴母细胞：体积明显增大，为成熟淋巴细胞的3～4倍。核膜清晰，核染色质疏松，呈细网状。核内见明显核仁1～4。胞浆丰富，嗜碱性，有伪足样突出。胞浆内有时可见小空泡。 （2）过渡型淋巴细胞：具有上述淋巴母细胞的某些特征。核质疏松，可见核仁，胞浆增多，嗜碱性强。体积比小淋巴细胞大。 （3）核分裂相细胞：核呈有丝分裂，可见 许多对成堆或散在的染色体。; ;*;① untransformed lymphocyte, small ② transitional cell ③ typical lymphoblast ; untransformed lymphocyte;Acute lymphocytic leukemia;Lymphoblast, 原始淋巴细胞;Lymphoblast, 原始淋巴细胞;核仁;图2（大图）、狗急性淋巴细胞性白血病血片，可见大量淋巴母细胞。 图3（小图）、外周血涂片，成熟小淋巴细胞;; ; ; ;;;;