hplc法测定怡身茶中黄芩苷 芍药苷与梓醇的含量研究-determination of baicalin paeoniflorin and catalpol in yishen tea by hplc.docx
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hplc法测定怡身茶中黄芩苷 芍药苷与梓醇的含量研究-determination of baicalin paeoniflorin and catalpol in yishen tea by hplc
中文摘要HPLC法测定怡身茶中黄苓苦、苟药苦与梓醇的含摘要怡身茶是由黄苓、赤苟、地黄、当归等7味中药材,按照现代制剂工艺制成的一种传统复方中药颗粒剂。具有清热解毒,滋阴补血等功效。原质量标准对水分、粒度、装量差异等制剂的常规质量项目进行了规定,未建立产品的含量测定方法。本文对怡身茶的君药和臣药中的有效成分进行含量测定研究,根据有效成分的理化性质、制剂工艺特点和共存药材成分相互干扰等情况,优选实验的最佳条件,制定了该制剂成品及中间体中黄苓晋、苟药营和梓醇的高效液相色谱含量测定方法,完善了该制剂的质量标准,并通过检验,制定了该制剂的7种原药材的质量标准,从而能够更全面地保证产品质量。第一部分HPLC法测定怡身茶中黄苓苦的含量目的:建立怡身茶颗粒及中间体中君药黄苓有效成分黄苓苦的含量测定方法。方法:取样品,加70%乙醇超声援取,用流动相稀释,制备供试品溶液。另取黄苓昔对照品,加流动相制备对照品溶液。再按处方制备阴性对照溶液。采用反相高效液相色谱法测定黄苓苦的含量。中文编委色谱条件选择:采用紫外分光光度计扫描,确定检测波长。以不同比例的甲醇:水:磷酸为流动相进行比较,确定最佳分离条件。标准曲线制备:以不同浓度的黄苓背对照品溶液,注入色谱仪,测其峰面积作为纵坐标,对照品溶液的浓度为横坐标,绘制标准曲线。精密度实验:取2个浓度的黄苓背对照品溶液,分别连续5次进样,测定峰面积,计算RSD。稳定性实验:将对照品溶液、供试品洛液放置,于不同时间测定其峰面积,检验其稳定性。重现性实验:取同一批样品,重复进行5次含量测定,检验测定结果。回收率实验:取己知含量的同一批样品,按高、中、低3个比例添加黄苓背对照品,测定含量,计算其平均回收率。含量测定:在上述条件下,按外标法测定10批怡身茶颗粒及中间体中黄苓营的含量,制定含量限度。结果:结合紫外吸收扫描图谱与药典规定,确定检测波长为280nmQ采用C18色谱柱(250mmX4.6mlTI,5μm),流动相以甲醇:水:磷酸(48:52:0.2),流速0.8mIlmin,分离效果最好,柱效高,峰形对称。黄苓背在0.204-2.04问范围内线性关系良好,回归方程:Y::1333.2X+247.68产0.9999(n=6)。本法精密度高,RSD=O.40%(40.8μglml),RSD=O.35%(81.6μg/ml)。对照品溶液48h内稳定,RSD0.46%,供试品溶液24h内稳定,RSD=0.55%。方法重现性好JRSD=O.98%。高、中、低3个比例添加黄苓昔对照品,平均回收率及RSD分别为98.69%,0.55%;98.69%,0.84%;98.11%J0.560/0(n=匀。通过含量测定,制定怡身茶颗粒中黄苓背含量不得低于0.30/0,中间体中黄苓昔的含量不得低于0.9%。2中文摘妥结论:该测定方法准确度高萝简便易行,重现性好。可用于怡身茶颗粒及中间体中黄苓昔的含量测定。第二部分HPLC法测定怡身茶中苟茹苦的含量目前:建立怡身茶颗粒及中间体中臣药赤苟有效成分苟药背的含量测定方法。方法:取样品费用70%乙醇超声提取?制备供试品溶液。另取苟药管对照品F力日70%乙醇制备对照品溶液。再按处方制备阴性对照溶液。采用反相高效液相鱼港法测定苟药营的含量。色谱条件选择:采用紫外分光光度计扫描F确定检测波长。筛选不同的流动相,确定最佳分离条件。标准曲线制备:以不同浓度的苟药背对照品溶液F注入色谱仪,测其峰面积作为纵坐标萝对照品溶液浓度为横坐标?绘制标准曲线。精密度实验:取2个浓度的苟药管对照品溶液量分别连续5次进样,测定峰面积F计算RSDo稳定性实验:将对照、品溶液与供试品溶液放置,于不同时间测定峰面积雪检验其稳定性。重现性实验:取同一批样品p重复进行5次含量测定9检验测定结果夺回收率实验:取已知含量的同一批样品?按高、中、低3个比例添加苟药管对照品?测定含量,计算其平均回收率。含量测定:在上述条件下?按外标法测定10批怡身茶颗粒及中间体中苟药背的含量,制定含量限度。结果:结合紫外吸收扫描图谱与实验结果?确定检测波长为230nm0采用C18色谱柱(250mmX4.6mm,3中文摘要5μm),流动相为0.05moL?L-1KH2P04-乙腊(80:20),流速1.Oml/min,分离效果最好,柱效高,峰形对称。苟药昔在0.303-6.067μg范围内更良好线性关系,回归方程Y401.76X+272.01严0.9997(n=6)。本法精密度高RSD=O.71%(60.672Jlg/ml),RSD=O.57%(121.344μg1ml)。对照品溶液24h内稳定,RSD=O.29%,供试品溶液8h内稳定,RSD=1.860/o。方法重现性好,RSD=1.38%。高、中、低3个比例添加苟药背对照品,平均回收率及RSD分别为96.
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