il4 aldh1a2基因多态性与重度膝关节骨性关节炎 发病风险的相关性研究-study on the correlation between il4 aldh 1a2 gene polymorphism and the risk of severe knee osteoarthritis.docx

目录中文摘要…………………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………………4英文缩写…………………………………………………………………8研究论文IL-4、ALDH1A2基因多态性与重度膝关节骨性关节炎发病风险的相关性研究前言………………………………………………………………9材料与方法………………………………………………………12结果………………………………………………………………18附图………………………………………………………………21附表………………………………………………………………23讨论………………………………………………………………28结论………………………………………………………………31参考文献…………………………………………………………32综述骨性关节炎发病相关因素的研究进展………………………36致谢……………………………………………………………………51个人简历………………………………………………………………52IL-4、ALDH1A2基因多态性与重度膝关节骨性关节炎发病风险的相关性研究摘要目的：从基因遗传角度，探讨华北地区汉族人群中IL-4(rs8179190)和ALDH1A2(rs3204689)的基因多态性与膝关节骨关节炎(kneeosteoarthritis,KOA)发病率及严重程度的关系，为我国KOA高危人群的普查与监测提供重要的分子依据，同时也为揭示KOA的治疗提供新的思路。骨关节炎(osteoarthritis，OA)是造成关节疼痛与功能障碍最常见的疾病，目前已成为全球第四大致残性疾病。现已证明OA是一种受多种因素调控的遗传性疾病。白介素4(interleukin-4，IL-4)是重要的抗炎性细胞因子，在骨关节炎的关节液中含量明显升高，有研究显示IL-4基因3内含子的可变重复序列多态性可能影响IL-4基因的表达，从而影响膝骨关节炎的发病。乙醛脱氢酶1家族A2成员(Aldehydedehydrogenase1familymemberA2，ALDH1A2)是催化视黄醛氧化为维甲酸的关键酶，维甲酸与其受体结合可以调控基因表达，进而调控细胞的生长和分化。国外研究证实ALDH1A2基因与重度手关节骨关节炎(handosteoarthritis)的发生明显相关。但目前国内对IL-4和ALDH1A2基因多态性与重度膝骨关节炎关系尚无文献报道，本研究有助于KOA易感基因的定位，有望为我国KOA高危人群筛查、早期防治、药物研制以及KOA基因芯片的开发提供重要依据。方法：采用基于人群的病例-对照研究方法，收集189例KOA患者作为病例组和195例相对健康个人作为对照组，在患者知情同意的情况下，采集每个研究对象的静脉血1ml，并记录其病史及相关个人资料。用TIANamp血液基因组提取试剂盒提取，收集的血液标本白细胞基因组DNA，采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism，PCR-RFLP)和聚合酶链反应-连接酶检测反应法(polymerasechainreaction-ligasedetectionreaction,PCR-LDR)，检测IL-4(rs8179190)和ALDH1A2(rs3204689)基因多态性位点的基因型及等位基因分布频率。数据统计分析采用SPSS13.0版软件包(SPSSCompany,Chicago,Illinois,USA)进行统计分析，P0.05认为有统计学意义。对每个基因位点的基因型及等位基因分布频率，进行Hardy-Weinberg平衡分析。对病例组与对照组的基因型及等位基因的分布频率比较采用行×列表卡方检验。将KOA患者按照膝关节影像学Kellgren-Lawrence(K/L)分级不同进行分组，利用卡方检验对病例组各基因型在不同组中的分布频率进行分析。按体质指数(BodyMassIndex,BMI)及年龄对所有研究对象进行分层分析，利用卡方检验比较基因型在各个分层中有无明显差异性。以非条件Logistic回归法计算经性别、年龄、BMI，校正的相对风险度的比值(oddsratio,OR)及其95%可信区间(confidenceinterval,CI)结果：1病例组与对照组中IL-4(rs8179190)、ALDH1A2(rs3204689)等位基因频率及基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg平衡(P0.05)，表明本研究人群具有群体代表性。2KOA患者组中BMI≥28kg/m2(2003年中国成人超重和肥胖症预防控制指南)个体的比例(比值为23.3%)显著高于健康对照组(比值为14.4%)（χ2=5