il17il17ra在子宫内膜异位症中的作用及机制初探-role and mechanism of il 17 il 17 ra in endometriosis.docx

独创性说明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的 地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含 为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材 料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了 明确的说明并表示了谢意。论文作者签名： 日期： 2015年6 月10 日关于论文使用授权的说明本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文，学校有权保 留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论 文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检 索和交流。□作者及导师同意论文公开及网上交流的时间： 自授予学位之日起；□ 自年月日起。作者签名：导师签名： 签字日期： 2015 年 6 月 10 日签字日期：2015 年 6 月 10 日摘要目的 观察白介素-17A（interleukin-17A, IL-17A)及其受体 A(interleukin-17receptor A, IL-17RA）在子宫内膜异位症中的作用，通过检测 IL-17A 下游基因的表达，初 步探讨 IL-17A 在子宫内膜异位症中的作用机制。方法 采用大鼠自体子宫内膜异位症模型，将大鼠随机分为 3 组，模型组（內异 症组，又分为异位内膜组和在位内膜组）、假手术组（脂肪组织代替内膜组织缝于 腹壁）和空白对照组（不做任何处理）；Real-time PCR 检测各组内膜组织中 IL- 17A 和 IL-17RAmRNA 水平；ELISA 和 Western blotting 检测各组内膜组织中 IL- 17A 和 IL-17RA 蛋 白 表 达 ； Western blotting 检 测 各 组 内 膜 组 织 中 JNK1/2 、 p- JNK1/2 、 ERK1/2 、 p-ERK1/2 、 MMP-9 、 MMP-7 、 MMP-2 、 cyclinD1 、 Bcl-2 、 Bax、VEGF、VEGFR1 蛋白表达；免疫组化方法检测 CD31 在各组内膜组织中的 表达，计算微血管密度。结果 1 内异症组织中 IL-17A/IL-17RA 表达增加：异位内膜组织 IL-17A/IL-17RA 蛋白表达较对照组增加，差异有统计学意义； 2 IL-17 激活 ERK 及 JNK 信号通 路：p-JNK 及 p-ERK 蛋白水平异位内膜最高、在位内膜次之、假手术组和对照组 内膜表达量最低，除假手术组与对照组之间差异无统计学意义外，其余各组组间比 较差异均有统计学意义；3 內异症组织中 IL-17 的几个下游基因表达出现差异：异 位内膜组织 MMP-9、MMP-7、MMP-2、cyclinD1 及 Bax 蛋白表达增加，均高于对 照内膜，Bcl-2 蛋白表达较对照组降低，差异均有统计学意义；4 内异症组织中 VEGF 蛋白表达及血管生成增加：异位内膜组织 VEGF 及其受体 VEGFR1 蛋白表 达较对照组显著增加，微血管密度增大，差异均有统计学意义。结论 内异症异位内膜组织 IL-17A/IL-17RA 高表达，通过 ERK1/2 及 JNK1/2 信 号通路，激活 MMPs 等下游基因，促进内异症新生血管生成，提示 IL-17A 及其信 号通路可能成为设计、开发预防和治疗内异症药物的新靶点。图 14 幅；表 6 个；参 131 篇。关键词：白介素-17A；白介素-17 受体；子宫内膜异位症 分类号：R715.5- I -AbstractObjectives To investigate the role of interleukin(IL)-17A and its receptor A( IL-17RA) in endometriosis and assess IL-17-driven inflammatory responses, so as to explore the mechanism of IL-17A/IL-17RA on endometriosis.Methods Twenty-four healthy, virgin, female Sprague Dawley rats (approximately weighing 180~200g and aged 8 weeks) were randomly allocated into three groups: endometriosis group(EMs, which is surgically created by autotransplanting pieces of uterine horn