凝胶渗透色谱(GPC)-分析测试中心.pptVIP

GPC基础知识 岛津国际贸易(上海)有限公司 分析中心 SEC定义 SEC全称Size Exclusion Chromatography(体积排阻色谱，或者尺寸排阻色谱） SEC定义：是利用多孔凝胶固定相的独特特性，而产生的一种主要依据分子尺寸大小的差异来分离的液相色谱方法。 SEC分类 凝胶渗透色谱 (GPC) 主要用于聚合物领域 以有机溶剂为流动相(氯仿，THF，DMF) 常用固定相填料：苯乙烯－二乙烯基苯共聚物 凝胶过滤色谱 (GFC) 主要用于生命科学领域 以水溶液为流动相 常用固定相填料：亲水性有机凝胶(葡聚糖，琼脂糖，聚丙烯酰胺等) GPC用途 高聚物的分子量及其分布是高聚物最基本的参数之一。高聚物的许多性质是与分子量有关的。例如冲击强度、模量、拉伸强度、耐热、耐腐蚀性都与高聚物的分子量和分子量分布有关。 GPC分离原理 固定相是多孔填料，小分子样品可以进入孔径内部 样品与固定相之间无作用力 迁移时间不同 GPC术语 排阻极限 排阻极限是指不能进入凝胶颗粒孔穴内部的最小分子的分子量。所有大于排阻极限的分子都不能进入凝胶颗粒内部，直接从凝胶颗粒外流出，所以它们同时被最先洗脱出来。排阻极限代表一种凝胶能有效分离的最大分子量，大于这种凝胶的排阻极限的分子用这种凝胶不能得到分离。随固定相不同，排阻极限范围约在 400至60×106之间。 渗透极限 能够完全进入凝胶颗粒孔穴内部的最大分子的分子量。 在选择固定相时，应使欲分离样品粒子的相对分子质量落在固定相的渗透极限和排阻极限之间。 平均分子量计算公式 平均分子量含义 数均分子量 (Mn) 拉力、抗冲击性 重均分子量 (Mw) 脆度 Z 均分子量 (Mz) 弹性、硬度 分布宽度指数D(分散度)= Mw/Mn 对于多分散试样 Mn ＜ Mw ＜ Mz 高聚物多分散性表征 样品间分子量分布宽度的比较，最直接的方法是将实验所得到的分子量分布曲线作对比。 分子量分布曲线有两种形式： 用重量分数W对分子量作图的曲线叫做微分分布曲线； 用累积重量分布对分子量作图的曲线叫做积分分布曲线。 还有一种更一般化且最常用的方法就是重均数均比，即：Mw/Mn。 测定聚合物分子量的方法 直接方法 渗透压方法 (for Mn) 光散射方法 (for Mw) 粘度方法 (for Mv) 超速离心方法 (for Mz) 间接方法 GPC (for Mn, Mw and Mz) 用标准品进样得到分子量校正曲线，间接算出聚合物样品的相对分子量。如和标准品结构不同，还需进行相应的计算才能得到聚合物样品自身的分子质量。 为什么要用GPC方法 相对分子量分布(多分散性指数)对聚合物的性质有重要影响。 在相对分子质量分布（多分散性指数）成为人们关注的热点后，经典方法却不能同时测定聚合物的相对分子质量分布。凝胶渗透色谱(GPC)的应用改善了测试条件，并提供了可以同时测定聚合物的相对分子质量及其分布的方法，使其成为测定高分子相对分子质量及其分布最常用、快速和有效的技术。 配置实例 GPC系统与常规HPLC系统区别 检测器 GPC系统标配示差折光检测器 常规HPLC有多种检测器可选 梯度 GPC系统是等度系统，并且用并联泵 常规HPLC可以是等度或者梯度 管路 GPC系统采用全不锈钢流路 常规HPLC用PEEK或者不锈钢流路 自动进样器针密封 GPC系统采用Vespel?针密封，适用THF、氯仿、DMF等 常规HPLC用PEEK针密封 LCsolution GPC软件 GPC色谱柱系列 Shim-pack GPC-80X for THF Shim-pack GPC-80XC for 氯仿 Shim-pack GPC-80XD for DMF 排阻极限 (聚苯乙烯) 1.5x103(GPC-801), 5x103(GPC-802), 2x104(GPC-8025), 7x104(GPC-803), 4x105(GPC-804), 4x106(GPC-805), 4x107(GPC-806)，4x107 (mixed gel，GPC-80M), 2x108(GPC-807) GPC色谱柱类型 普通凝胶柱 按照不同的排阻极限分成很多种型号(如GPC-80X) 每种排阻极限的柱子使用同一种凝胶颗粒 在一段范围内校正曲线成线性 混合凝胶柱 一种型号(如GPC-80M) 使用混合凝胶颗粒 在较宽范围内校正曲线都成线性，可消除不同柱子串联时可能产生非线性校正曲线导致结果偏差的问题 GPC色谱柱选择 按照样品所溶解的溶剂来选择柱子所属系列 THF、氯仿、DMF 必须选择合适的溶剂来溶解聚合物 按照样品分子量范围来选择柱子型号 样品分子量应该处在排阻极限和渗透极限范围内，并且最好是处在校正曲线线性范围内