第5章 转录和 与转录后加工（上） 药学分子生物学课件.pptVIP

第五章 转录与转录后加工;第一节 转录的基本原理;E.coli在 0?C时需13秒钟才能加上一个核苷酸，但在37?C每秒就可加上40个核苷酸; 利用这个差别以14C来标记U,在0?C培养E.coli; 提取这种正在伸长的mRNA分子; 发现14C标记首先出现在伸长的3’端，因此可以证明合成是延着5’ 3’方向进行的。;--转录的起始有关的序列称启动子，终止有关的序列称终止子.因此,启动子和终止子皆指DNA序列. --将作为转录模板的DNA单链称为模板链或反义链(antisense strand), 非模板链称为有义链（sense strand）或编码链。在体外,DNA的两条链都可作为RNA合成的模板。;（1）转录时只有一条DNA链为模板，而复制时两条链都可作为模板； （2）DNA-RNA杂合双链不稳定，RNA合成后释放，而DNA复制叉形成后一直打开，新链和母链组成子链； （3）RNA合成不需引物，而DNA复制需引物； （4）转录的底物是rNTP，复制的底物是dNTP； （5）聚合酶系不同。 ;第一节 转录的基本特征 第二节 与转录起始和终止有关的DNA结构 第三节 mRNA的合成与加工 第四节 非编码RNA的合成与加工 ;第二节 与转录起始和终止有关的DNA结构;基因可以以不同的效率表达。 如图:基因A的转录远远高于基因B.;From Gene to protein ;From Gene to protein ;启动子(promoter)指RNA聚合酶识别、结合并其始转录的一段具有高度保守性DNA序列。 关于上游和下游 ;RNA聚合酶与启动子的结合位点的鉴定; E.coli中不同的?因子可识别不同的启动子;典型原核生物启动子的结构;示例;2. -10 序列;TATAAT→AATAAT，转录效率下降,称为下降突变（down mutation）。 TATGTT→TATATT，转录效率上升，为上升突变（up mutation）。;3.-35 序列 其保守序列为：;5.CAP 结合位点;(二) 终止子结构;不依赖ρ因子的终止子;依赖ρ因子的转录终止;二、真核生物启动子;(一). RNA Polymerase I 启动子;(二). RNA Polymerase II 启动子;1.起始子 Initiators（Inr） 转录的第一个碱基大多为A, 保守序列　PyPyANT/APyPy;RNA Polymerase II 启动子－－上游调控元件;4. 增强子Enhancers;(三). RNA Polymerase III 启动子;启动子在基因内部;5S rRNA : box A , box C;关于真核生物RNA聚合酶、启动子和转录因子的说明： RNApol仅仅是一台转录机器，该机器何时???何处、何种速度转录DNA，取决于转录因子与DNA顺式作用元件（启动子和增强子）的相互作用对聚合酶的活化或抑制作用。 启动子不直接和RNA pol结合；需多种转录因子介入。;三 原核生物和真核生物转录启动子的异同