抗生素效价测量系统中的信号采集与处理技术分析-analysis of signal acquisition and processing technology in antibiotic titer measurement system.docxVIP

第一章绪论§1-1抗生素效价综述1-1-1课题意义本学位论文所研究的课题来源于山东省滨州市药品检验所新产品的科研项目。为了满足对抗生素效价仪器的更高要求，本项目是基于效价硬件系统的抗生素效价测量的软件开发。它应该具有采集精度高、速度快、误差小、操作方便的特点。在治疗感染性疾病中，抗生素一直以来发挥着极为重要的作用，随着抗生素的新品种的不断涌现，其种类繁多，应用较为广泛。2010年出版的《中国药典》总共收录抗生素类药品356种，在前一版药典基础上，新增的就有64种。抗生素含量作为保证药物的有效性评价药物的质量重要指标，其检定方法是科研、监督检验、药品生产等领域中的一项重要检测指标之一，也是临床用药安全有效的重要技术保障措施之一。最新版本的中国药典与旧版相比，在生物鉴定法中做出了个别的调整，使其检定依据更加合理，故此，本课题同时也是在新版药典的理论基础上进行了研究设计。抗生素对生命现象比较敏感，是一种生理活性物质，一般由霉菌、细菌或者其它微生物产生能够杀灭或者抑制其它微生物的一类物质以及衍生物。抗生素用于治疗敏感微生物（常为细菌或真菌）所致的感染。目前应用于临床的抗生素主要有以下几类：β-内酰胺类：青霉素类、头孢菌素类、大环内酯类、林可霉素类，万古霉素类及人工合成抗菌药等。抗生素的效价用抗生素的生物效能表示，通常各种抗生素的单位，是根据国家抗生素标准品测定出来的，是衡量药物有效成份的一种尺度。1-1-2抗生素效价测量方法的研究现状抗生素的效价是至关重要的，其含量测定的方法主要分为物理化学分析法和微生物检定法两大类。其中物理化学方法又分为光谱分析法、电化学分析法、一般化学分析法、色谱分析法。在《中国药典》2010年版中，主要采用的抗生素类药品含量测定方法有紫外-可见分光光度法、容量分析法和微生物检定法[1]。药典中的抗生素常规检定方法为微生物效价检定法[2-3],即用抗菌活性衡量抗生素中有效成分的效力。这种方法可以直接反映抗生素疗效,并具有灵敏度高、使用的供试品量少等特点。因此,在抗生素效价检定中此法被广泛应用。抗生素效价检定结果的准确性,会直接影响药品使用的安全性和有效性。作为一种经典的检测方法,微生物效价检定法有着其独特的优点[4],它的测定方法是抗生素效价检定的一个热点问题，不是一成不变的。国内对此进行了大量的研究,积累和提供了一定的经验。但该方法也存在一些缺点，例如耗时长、操作步骤多、试验影响因素较多,为了使检定方法更趋完善，很多效价检定工作者在积极地探索其改进并寻找其替代方法。抗生素微生物检定法的原理是，根据量反应平行法，在一定的温度条件下，利用特定的方法检测抗生素对于微生物抑制作用，以此计算效价的方法。由于这种方法是以抗生素对微生物的抑制程度衡量抗生素效价，因此在实验过程中，待测品必须同效价已知的标准品相比较来确定效价。此外，抗生素的分子组分结构复杂，在药物的开发初期一般还未开发出较专属的理化测定方法，而抗生素微生物检定法的测定结果比较直观，这使得它成为测定抗生素含量的最基本的方法。现今，对于多组分抗生素来说，微生物检定法仍然是首选的含量测定方法[5-6]。微生物效价检定法主要包括管碟法和浊度法。管碟法作为法定的抗生素生物检定方法，是琼脂扩散法的一种，已被各国药典广泛采用。管碟法系利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，比较供试品与标准品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，来测定供试品效价的一种方法[7-8]。中国历版药典均记载了管碟法，此法是抗生素效价的经典方法。管蝶法常用的试验菌包括金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、短小芽孢杆菌、大肠埃希菌、啤酒酵母菌、枯草芽孢杆菌等。管碟法的好处是其试验结果稳定、灵敏度较高，能够直接显示抗生素的抗菌效价，其基本操作方法适合各种抗生素，可以一次测定大批样品[9,11,13-15]。但由于管碟法的操作步骤多，试验时间需要24小时以上，同时对操作人员技术要求极为严格，受抗生素自身的理化特性等多种因素的影响和制约，影响试验结果的因素较多，比如钢管不规则,截面不平整等均会导致抑菌圈不规则；且培养皿厚度不均也会影响抑菌圈的大小、规则及圆整程度；器械洗涤不彻底造成的误差；培养基、试验菌的选择与保存不当等。由于不同组分扩散系数的差异，尤其多组分抗生素，受培养基的影响最为明显。浊度法是根据悬浮体的透射光或散射光的强度以测定物质组分含量，其主要用于检测能形成悬浮体的沉淀物质,例如微量磷、硫、氯和钙等的测定。当光线通过有一定浊度的溶液时,由于悬浮体有选择性地吸收了一部分光能,且悬浮体向各个方向散射了一些光线,减小了透光率。通过测量透光率的变化量来精确确定所采集菌液的浊度变化量。浊度实验速度快，试验过程三到四小时，加其他操作，当天便可获得结果，易于操作，结果用仪器测定等优点;采用液体培养基，消除多组分抗生素在固体培