口蹄疫病毒非结构蛋白基因3abc 3ab 3a的克隆表达及3a蛋白间接elisa方法的初步建立-cloning and expression of foot-and-mouth disease virus nonstructural protein gene 3 abc 3ab 3a and establishment of indirect elisa method for 3a protein.docxVIP

VIIVII编 号 名 称 页 码图 3-5图 3-6图 3-7图 3-8图 3-9图 3-10图 3-11图 3-12图 3-13图 3-14表 4-1图 4-1图 4-2表 4-2表 4-3表 4-4表 4-5表 4-5重组表达载体 pET-28a-3AB 的双酶切产物 53重组表达载体 pET-41a-3AB 的双酶切产物 54重组表达载体 pET-28a-3A 的双酶切产物 54重组表达载体 pET-41a-3A 的双酶切产物 54IPTG 诱导表达 SDS电泳 56重组蛋白的可溶性分析 56重组蛋白的可溶性分析 57蛋白定量分析(μl /ml) 57蛋白纯化 58表达蛋白的 Western-blotting 鉴定 58最佳包被浓度和血清稀释浓度的确定 66封闭液和封闭时间的确定 67底物作用时间的选择 67特异性试验结果 68重复性试验（批内） 68重复性试验（批间） 69符合性实验 69对比试验 70VIIIVIII引文所缩略表缩略语 英 文 全 称 中 文 全 称Amp+ Bp BSA cDNA DNA ELISA FMD FMDVg IPTGKan+ Kda LBmin PCR RNA RT-PCR SSDSSDSTEMEDμLX-galAmpiciline Base pairBovine serum albumin Complementary Deoxyribonucleic acidEnzyme-linked immuosorbent assay Foot-and-mouth diseaseFoot-and-mouth disease virus GramIsopropyl-β-D thiogalacosideKanamycin KiladaltonLuria-Bertani medium MinutePolymerase chain reaction Ribonucleic acidReverse transcription-PCR SecondSodium dodecyl sulfateSodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresisN,N,N’,N’-Tetramethylethylenediamine Microliter5-bromo-4-cholro-3-indolyl-β-D-galactoside氨苄青霉素 碱基对 牛血清白蛋白 互补 DNA 脱氧核糖核酸酶联免疫吸附测定 口蹄疫口蹄疫病毒 克异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 卡那霉素千道尔顿 LB 培养基 分钟聚合酶链反应 核糖核酸 反转录 PCR 秒十二烷基磺酸钠十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶 电泳N,N,N’,N’-四乙基乙二胺 微升5-溴-4-氯-3-吲哚-β- D-半乳糖苷独 创 性 声 明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作 及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包 含为获得新疆农业大学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材 料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作 了明确的说明并表示了谢意。研究生签名： 时间： 年 月 日关于学位论文使用授权的说明本人完全了解新疆农业大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：新疆农业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复 印件和电子文档，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇 编学位论文，允许论文被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学 位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以公布（包 括刊登）论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名： 时间： 年 月 日导师签名： 时间： 年 月 日 PAGE PAGE 10新疆农业大学硕士学位论文第 1 章 口蹄疫概述及研究进展1.1 口蹄疫概述口蹄疫（Foot-and-mouth disease,FMD）是由口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus,FMDV）引起的一种急性、接触性和高致病力动物传染病[1]。主要感染牛、羊和猪 等偶蹄类家畜，给畜牧业及其相关产业如肉、奶、皮毛等加工业造成巨大的经济损失， 国际兽医局(OIE)将其列为 A 类动物传染病之首[2-3]。本病可引起病畜舌面、口腔粘膜、 鼻镜、乳头发生小泡，水泡逐渐变大，最后溃烂形成烂斑，病畜往往出现高体温，几天 不进食，约在两周后开始进食。在自然感染条件下，病毒主要侵入途径是呼吸道，可通 过直接或间接接触、媒介、空气等进行传播。FMD 一般良性经过，约经一周可以治愈； 对成年病畜的致死率不高，约为 5%，但会影响其生长；对幼畜