苦参碱对肝纤维化大鼠肝组织中tgf-effects of matrine on tgf in liver tissue of rats with hepatic fibrosis.docxVIP

苦参碱对肝纤维化大鼠肝组织中tgf-effects of matrine on tgf in liver tissue of rats with hepatic fibrosis.docx

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苦参碱对肝纤维化大鼠肝组织中tgf-effects of matrine on tgf in liver tissue of rats with hepatic fibrosis

南华大学学位论文原创性声明本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名:年月日南华大学学位论文版权使用授权书本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以编入有关数据库进行检索,可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文;学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。对于涉密的学位论文,解密后适用该授权。作者签名:导师签名:年月日年月日目录主要英文缩略语索引2中文摘要4英文摘要6正文8前言8实验材料10实验方法11实验结果20讨论33结论40参考文献41附图43综述45成果附录53致谢54主要英文缩略语索引HFhepaticfibrosis肝纤维化ECMextracellμlarmatrix细胞外基质HSChepaticstellatecells肝星形细胞HGFHepatocytegrowthfactor肝细胞生长因子TGF-βTransforminggrowthfactor-β转化生长因子-βsiRNAsmallinterferingRNA小干扰RNACCL4carbontetrachloride四氯化碳bFGFbasefibroblastgrowthfactor碱性纤维细胞生长因子TIMPstissueinhibitorofmetalloproteinase组织金属蛋白酶抑制因子dsRNAdouble-strandedRNA双链RNAFCfibroblasticcell成纤维细胞WBwesternblot蛋白质印迹RT-PCRReverseTranscription-PolymeraseChainReaction逆转录多聚酶链式反应MFLCmyofibroblastic-likecell肌成纤维样细胞SPSSstatisticalpackageofsocialscience社会科学统计软件包苦参碱对肝纤维化大鼠肝组织中HGF及TGF-β1表达的影响研究生:何潇导师:徐海帆副教授中文摘要目的:以四氯化碳(CCL4)单纯+复合造模法诱导大鼠HF模型,不同浓度苦参碱对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1及HGF表达的影响,探讨苦参碱对肝纤维化(HF)大鼠的防治作用。方法:健康雄性SD大鼠52只,随机分为5组,分别为正常组(4只)、模型组、γ-干扰素组、苦参碱低剂量组、苦参碱高剂量,各12只。模型组、γ-干扰素组、苦参碱高剂量组、苦参碱低剂量组均采用四氯化碳(CCL4)原液及悬浊液皮下注射制备大鼠肝纤维化模型。各组大鼠在造模4W,8W分两次取材。每次正常组处死2只,余各组随机处死6只。用RT-PCR,westernblot分别检测各组肝组织中TGF-β1与HGFmRNA及蛋白的表达,同时取肝中组织病理切片进行HE染色,并在光学显微镜下观察大鼠肝组织纤维化程度。结果:1、肝纤维化大鼠模型建立:与正常组比较,模型组肝纤维化组织学半定量计分系统(sss)明显增高,正常组:x±s=0;模型组:x±s=11.619±1.563。P0.05;与模型组比较,苦参碱低剂量组(x±s=10.8500±1.365)计分无差异,P0.05;苦参碱高剂量组:x±s=7.4287±0.694;γ-干扰素组:x±s=7.5851±0.798;与模型组比较计分明显降低,P0.05;苦参碱高剂量组与γ-干扰素计分无明显差异P0.05。2、苦参碱对肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1的影响:在正常组中,TGF-β1有表达。肝纤维化时,肝组织中TGF-β1的含量较正常组织明显上升(P<0.01)。与模型组相比,苦参碱高剂量组及γ-干扰素组TGF-β1表达均有降低(P<0.05),以苦参碱高剂量组TGF-β1降低最为明显。且随苦参碱使用时间的增加,降低趋势越明显。苦参碱低剂量组与模型组相比,其肝组织TGF-β1的表达虽有所降低,但与模型组相比却无明显差异(P>0.05)。苦参碱高剂量组与γ-干扰素组相比无明显差异(P>0.05)。3、苦参碱对肝纤维化大鼠肝组织HGF的影响:模型组大鼠肝组织中HGF的表达较正常组明显降低(P<0.01)。与模型组相比,苦参碱高剂量组与γ-干扰素组HGF表达均有增加(P<0.05),以苦参碱高剂量组HGF增加最为明显。苦参碱高剂量组及γ-干扰素组均可升高肝组织中HGF的含量,且随使用苦参碱时间的延长,高剂量组及γ-干扰素组HGF升高的作用越为明显

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