榼藤子总皂苷抗糖尿病作用及其机制分析-antidiabetic effect and mechanism analysis of total saponins from sinomenium fortunei.docxVIP

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2018-05-29 发布于上海
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榼藤子总皂苷抗糖尿病作用及其机制分析-antidiabetic effect and mechanism analysis of total saponins from sinomenium fortunei

目录摘要IAbstractIII第1章绪论11.1前言11.2榼藤子简介11.2.1榼藤子化学成分研究简述11.2.2榼藤子的药理活性研究简介11.32型糖尿病（T2DM）与脂代谢紊乱21.3.1糖尿病的定义和分类2T2DM的治疗现状2T2DM—―糖脂病（DiabetesMellipodtus）‖31.4本研究的目的与意义5第2章榼藤子总皂苷对T2DM大鼠的治疗作用62.1前言62.2仪器与试剂62.2.1主要仪器62.2.2试剂72.3实验动物72.4榼藤子总皂苷的制备72.5实验方法82.5.1T2DM大鼠模型的建立82.5.2动物分组和给药82.5.3空腹血糖（FPG）的测定82.5.4胰岛素耐量实验（ITT）82.5.5口服糖耐量实验（OGTT）82.5.6血清胰岛素含量的测定82.5.7血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）等含量的测定92.5.8统计学分析92.6实验结果92.6.1榼藤子总皂苷对大鼠FPG和体重的影响92.6.2榼藤子总皂苷对血清胰岛素含量的影响92.6.3榼藤子总皂苷对ITT和OGTT结果的影响112.6.4榼藤子总皂苷对血清中TC、TG等含量的影响112.7讨论12第3章榼藤子总皂苷通过激活腺苷酸环化蛋白激酶（AMPK）途径影响T2DM大鼠体内脂质沉积143.1前言143.2仪器与试剂143.2.1主要仪器143.2.2试剂153.3实验动物163.4榼藤子总皂苷的制备163.5实验方法163.5.1T2DM大鼠模型的建立163.5.2动物分组和给药163.5.3肝脏HE染色病理切片的制作163.5.4肝脏和骨骼肌组织中TC、TG含量的测定163.5.5肝脏组织细胞内AMPK蛋白表达及其磷酸化水平的检测163.5.6骨骼肌组织细胞内AMPK蛋白表达及其磷酸化水平的检测173.5.7统计学分析173.6实验结果173.6.1肝脏HE染色病理切片结果173.6.2榼藤子总皂苷对肝脏和骨骼肌中TC、TG含量的影响183.6.3肝脏组织细胞内AMPK蛋白表达及其磷酸化水平的检测结果193.6.4骨骼肌组织细胞内AMPK蛋白表达及其磷酸化水平的检测结果193.7讨论20第4章榼藤子总皂苷对T2DM大鼠的氧化应激、微炎症状态的改善作用234.1前言234.2仪器与试剂244.2.1主要仪器244.2.2试剂244.3实验动物244.4榼藤子总皂苷的制备254.5实验方法254.6.3榼藤子总皂苷对胰腺组织病理切片结果的影响274.7讨论28结论30参考文献32致谢38附录A：攻读学位期间发表的学术论文39附录B：相关溶液的配制40附录C：中英文对照缩略词表43摘要傣药榼藤子为豆科榼藤子属植物榼藤子Entadaphaseoloides(Linn.)Merr.的干燥种仁。该属植物广泛分布于非洲和美洲，全世界共约30种，我国产1种。榼藤子主要应用于治疗胃痛、痔疮、水肿、便秘等病症。现代药理研究表明，榼藤子属植物具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、抗炎镇痛等多种生物活性。为了更好开发利用该药用植物资源、创造经济效益和服务社会，我们对榼藤子总皂苷的抗2型糖尿病（T2DM）活性进行了研究，并对其作用机制进行了初步探讨。本文通过采用高脂饲料喂养并结合注射小剂量链脲佐菌素（STZ）的方法建立T2DM大鼠模型。本文实验动物分组为：正常对照组、T2DM组、二甲双胍组（200mg.kg-1）、榼藤子总皂苷25mg.kg-1、50mg.kg-1和100mg.kg-1组，每组各8只，通过灌胃方式按体重给药，每天给药一次，持续21d。本文实验结果显示：榼藤子总皂苷各给药剂量均具有良好的降血糖活性，呈现出明显的量效关系。其中榼藤子100mg.kg-1剂量组效果最好，给药治疗第21d，该组血糖均值为9.8mmol.L-1，优于二甲双胍组的10.1mmol.L-1，而同期T2DM组血糖值为18.3mmol.L-1。在胰岛素耐量实验（ITT）和口服糖耐量实验（OGTT）实验中，榼藤子总皂苷各给药组均不同程度上表现出改善胰岛素抵抗（IR）的活性。T2DM组大鼠伴有严重的高胰岛素血症，治疗后，各给药组均可显著降低血清中胰岛素含量，同样也说明榼藤子总皂苷具有改善T2DM大鼠的IR状态的作用。此外，T2DM组大鼠还表现出严重的脂代谢紊乱症状，经给药治疗后，榼藤子总皂苷可降低血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量并增加高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的含量。表明榼藤子在改善脂代谢紊乱方面具有重要作用。通过对肝脏组织病理切片的分析发现，T2DM组大鼠肝脏组织中可见大量脂质沉积、大量变性脂肪颗粒呈空泡样分布等，这些特征明显有别于正常对照组。在对肝脏和骨骼肌组织中TC和TG含量进行测定后发现，T2DM