抗apob-anti apob.docxVIP

独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个 人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均 已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后 果 。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借 阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进 行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密□ ，在年解密后适用本授权书。不保密□。（请在以上方框内打“√” ）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日目录英汉缩略词简表 1摘要 2Abstract.4前言 6参考文献 9（一）材料与方法 111.材料、试剂、设备 112.实验方法 13（二）实验结果 23（三）讨论 31（四）参考文献 34综述 37参考文献 41附录 45致谢 46英汉缩略词简表英文缩写英文全称中文全称ASatherosclerosis动脉粥样硬化ABCA1ATP-binding cassette A1ATP 结合盒转运子 A1ABCG1ATP-binding cassette G1ATP 结合盒转运子 G1ACATAcy1 CoA (Coenzyme A):CholesterolAcyltransferase乙酰辅酶 A 胆固醇酯酰转移酶APAmmonium persulfate过硫酸铵ApoApolipoprotein载脂蛋白DMSODimethyl sulfoxide二甲基亚砜DEPCDiethyl pyrocarbonate焦炭酸二乙酯DTTDithiothreitol二硫苏糖醇EDTAEthylene diaminetetraacetic acid乙二胺四乙酸EMSAElectrophoretic mobility shift assay电泳迁移率变动分析PBSPhosphate bufferred saline磷酸盐缓冲液PMAPhorbol myristate acetate佛波酯PPARαPeroxisome proliferator-activated receptor α过氧化物酶体增值物激活受体 αPMSFPhenylmethylsufonyl fluoride笨甲磺酰氟TLRToll-like receptorToll 样受体Ox-LDLOxidized low-density lipoprotein氧化低密度脂蛋白NF-kBNuclear factor-kB核因子 κBRT-PCRReverse transcription-PCR逆转录 PCRTEMEDTetra methylethlene diamine四甲基乙二胺IL-6Interleukin -6白介素-6CD36Cluster of differentiation 36B 类清道夫受体PIGPassive immunization group被动免疫干预AIGActiveimmunization group主动免疫干预抗 ApoB-100 抗体抑制 apoE-/-小鼠动脉粥样硬化发展研究生：李松海导师：魏宇淼 副教授 华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管病研究所摘要目的： 研究抗 apoB-100 抗体抑制 apoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变发展的可能机制—抑制炎症反应和促进胆固醇逆向转运。方法：雄性 6 周龄 C57BL/6J 背景的 apoE-/-小鼠随机分成四组，每周检测小鼠体重 变化。7 周龄开始每 3 周分别给予弗氏佐剂(F-Adjuvant)、弗氏佐剂+apoB-100 抗原 肽段、牛血清白蛋白（BSA）、apoB-100 抗体干预，22 周龄时结束干预。干预过程 中自 7 周龄开始每隔 3 周采取小鼠眼眶静脉血 ELISA 法测试 apoB-100 抗体滴度。 干预结束后采集血液标本，分离肝脏、心脏及主动脉并在-80℃液氮中冻存；检测血 清炎症因子 IL-6、TNFα、CRP、MCP-1 浓度及血脂 TG、TC、HDL、LDL 浓度； 分离出单个核细胞用于 RT-PCR 法检测 PPARα、ABCG1、ACTA、SR-BI、NF-κB 及 CD36 的基因表达和用于 EMSA 法检测 PPARα 及 NF-κB 的活性。Western 法检测 ACAT、ABCA1、ABCG1、NF-κB、CD36 的蛋白表达情况。油红 O 染色检测主动