酪酸梭菌对溃疡性结肠炎小鼠itfnf-clostridium butyricum on it fnf of ulcerative colitis mice.docx

酪酸梭菌对溃疡性结肠炎小鼠ITF，NF-κB和TNF-α表达的影响及意义中文摘要目的：通过观察酪酸梭菌对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的实验性溃疡性结肠炎（UC）小鼠结肠黏膜中肠三叶因子（ITF）、组织核因子-κB（NF-κB）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响，了解酪酸梭菌对UC的作用及可能的机制。方法：60只雄性BALB/c小鼠，6-8周龄，体重19.0±2.0g，清洁级。随机分为六组，分别为正常组、模型组、阴性对照组、阳性对照组、酪酸梭菌低剂量组、酪酸梭菌高剂量组，每组10只。正常组自由饮用蒸馏水，其余各组饮用3%DSS（分子量3.6万-5万）七天建立急性UC小鼠模型。造模开始第二天，除正常组外，余各组同时分别给予空灌胃针、无菌生理盐水、美沙拉嗪29.80mg/ml、酪酸梭菌菌液1×106CFU/ml、1×107CFU/ml灌胃，0.2ml/次，2次/日。实验期间观察并记录小鼠的一般情况、体重、粪便性状及隐血情况，实验第八天用折颈法处死小鼠，游离并取出全段结肠，测量回盲部至肛门的长度。然后用预冷生理盐水洗净结肠，取部分结肠组织4%的甲醛固定，常规石蜡包埋、HE染色；其余结肠组织保存在-70℃，以备制作组织溶浆。观察指标包括：疾病活动指数（DAI）、结肠长度、组织学损伤评分；免疫组织化学法检测结肠组织中ITF和NF-κB的表达；放射免疫法检测TNF-α的表达。结果：1．饮用DSS后各干预组小鼠均不同程度地出现腹泻、粘液便、血便等症状，随天数增加小鼠DAI积分逐渐增高。酪酸梭菌可以改善小鼠的一般状况，降低小鼠的DAI积分、组织学损伤评分，与模型组比较差别有统计学意义（P＜0.05）。2．与模型组和阴性对照组相比，酪酸梭菌和美沙拉嗪处理组UC小鼠结肠黏膜中ITF的表达升高(P＜0.05)；NF-κB和TNF-α的表达下降(P＜0.05)。其中酪酸梭菌低剂量组和阳性对照组效果相当（P＞0.05）。结论：DSS诱导的急性结肠炎能模拟临床UC的发作特点。酪酸梭菌对急性UC有治疗作用，疗效与剂量有一定的相关性，其部分机制可能与酪酸梭菌能增加ITF的表达，抑制NF-κB和TNF-α的表达有关。关键词：溃疡性结肠炎；酪酸梭菌；肠三叶因子TheeffectsofclostridiumbutyricumonexpressionofITF,NF-κBandTNF-αinmurineintestinalmucosawithulcerativecolitisAbstractObjective：ToobservetheeffectsofclostridiumbutyricumontheexpressionofITF,NF-κBandTNF-αinmurineintestinalmucosawithulcerativecolitisanditspossiblemechanism.Methods：60specificpathogenfree,6-8week-oldmaleBALB/cmice(weight19.0±2.0g),wererandomlydividedinto6groups:normal,model,negativecontrol,positivecontrol,clostridiumbutyricumlow-dose,clostridiumbutyricumhigh-dosegroup.10micewereinvolvedineachgroup.Thenormalgroup-micewerefedwithdistilledwater.Interventiongroup-micewerefedwith3%dextransulfatesodium(DSS,MW:36000-50000)freelyfor7continousdaystocompleteulcerativecolitismodle.Atthesametime,exceptnormalgroup,everyexprementalgroupwasorallyadministratedemptyneedle,physiological-saline,mesalazine(29.80mg/ml),clostridiumbutyricum(1×106CFU/ml),clostridiumbutyricum(1×107CFU/ml)respectively.Duringtheexprement,generalsituation,dailyweight,stooltraitandoccultbloodwererecorded,andmicewerekilledonthe8thday.Isolatedthewholecolon,andtakenpieceofcolonformaldehydef