梁山慈竹体细胞突变体no.30的研究-study on the mutant no.30 in somatic cells of neosinocalamus liangshan.docxVIP

万方数据 万方数据 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人 已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得西南科技大学或 其它教育机构的 学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作 了明确的说明并表示了谢意。 签名: 王伊 日期:fe必 6. ， 二 关于论文使用和授权的说明 本人完全了解西南科技大学有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权 保留学位论文的复印件，允许该论文被查阅和借阅;学校可以公布该论文的全部 或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。(保密的学位论文在 解密后应遵守此规定) 路王剌导阳:切也日期: 2.-016. 6. f 西南科技大学硕士研究生学位论文 第 I 页 摘要 以梁山慈竹实生植株及其体细胞突变体 No.30 植株为材料，对其株高、胸径、 生物量等表型特征；纤维素含量、木质素组分与含量等茎秆化学成分特征；纤维 形态以及组织切片等解剖学特征；基于 SLAF-Seq 技术的遗传变异检测；基于 RNA-Seq 技术的转录组变化以及转录因子生物信息学分析等多个方面进行研究， 主要研究结果如下： 1. 突变体 No.30 号株高、胸径、茎秆鲜重、干重以及茎秆竹节数等方面均高 于对照，差异具有生物统计学意义。 2. 突变体 No.30 的纤维素含量比对照高 27.89%；纤维长度以及长宽比显著高 于对照植株；纤维宽度、细小纤维含量与对照相比没有差异；S/G 值并没有显著变 化。 3. 突变体 No.30 细胞壁有着更强的双折射现象，并且细胞之间排列更为紧密； calco?uor 染色荧光信号更强，Wiesner 染色反应显示其原生木质部以及后生木质部 导管部位着色更深；中心维管束高和宽、外方纤维股厚度、内方纤维股厚度分别 比对照高，差异具有生物统计学意义；导管直径无显著差异。 4.与对照相比，经过引物 ISSR-C、D、E 扩增，体细胞突变体 No.30 有新谱带 出现和原有谱带的缺失；ISSR-C 扩增后 No.30 缺失 ISSR-C1000 谱带，新增 ISSR-C330 和 ISSR-C480 谱带；ISSR-E 扩增后 No.30 缺失 ISSR-E225 谱带，新增 ISSR-C412 和 ISSR-C2000 谱带；ISSR-D 扩增后 No.30 新增 ISSR-C760 和 ISSR-C2000 谱带，表明其 在分子水平上发生了变异。SLAF-seq 测序结果，共获得 4,142 个 INDEL 标记。 ISSR-PCR 以及 SLAF-seq 测序为突变体 No.30 在基因组水平上产生的变异提供强 有力的证据。 5.对突变体 No.30 以及对照植株生长途径中的相关基因 CesA、Csl、4CL、PAL、 CAD、LAC、Prx、CCR、MYB、NAC、WRKY 和 bZIP 表达模式进行分析。推测突 变体 No.30 中 CesA7 的上调表达可能是其纤维素含量升高的重要原因；PRX 上调 西南科技大学硕士研究生学位论文 第 II 页 表达可能是其木质素含量升高的重要原因。 6.对转录组数据库转录因子生物信息学分析，筛选出在突变体 No.30 植株和对 照 植株 中氨 基酸 序列 表现出 变异 的基 因。 其中 NAC 转录 因子 T4 Unigene BMK.39098 和 T5 Unigene BMK.42136、T4 Unigene BMK.42791 和 T5 Unigene BMK.41686 可能在植株衰老过程中行使功能，未含有 NAC 转录因子结构域的 T4 Unigene BMK.41300 和 T5 Unigene BMK.38663 可能与细胞壁次生壁合成紧密相 关；MYB 转录因子 T4 Unigene BMK.46978 和 T5 Unigene BMK.45130 可能在植株 抗非生物胁迫过程中行使功能；WRKY 转录因子 T4 Unigene BMK.43418 和 T5 Unigene BMK.39189、T4 Unigene BMK.34021 和 T5 Unigene BMK.27067 可能在植 株非生物胁迫响应中行使功能。 关键词：梁山慈竹；体细胞突变体；SLAF-Seq；RNA-Seq；转录因子 西南科技大学硕士研究生学位论文第 西南科技大学硕士研究生学位论文 第 PAGE IV 页 万方数据 万方数据 Abstract The plant of seeds from Dendrocalamus farinosus and the somaclonal mutant No.30