第四章 荧光分析法 现代食品检测技术知识 .pptVIP

第四章 荧光分析法;第一节 概述;③生物发光：分子的激发能量是由生物体释放 出来的能量所提供所产生的发光现象。 2、按分子激发态的类型来划分 ①荧光：由第一电子激发单重态所产生的辐射 跃迁而伴随的发光现象。 ②磷光：由最低的电子激发三重态所产生的辐 射跃迁而伴随的发光现象。;第二节 分子荧光分析法及其基本原理 一、荧光与磷光的产生过程;2.电子激发态的多重态;外转换：激发分子与溶剂或其他分子之间产生 相互作用而转移能量的非辐射跃迁； 外转换使荧光或磷光减弱或猝灭。 系间跨越：不同多重态,有重叠的转动能级间的 非辐射跃迁。 10-2s～10-6s 改变电子自旋，禁阻跃迁，通过自旋—轨 道耦合进行。 ;（2）辐射能量传递过程;磷光发射：电子由第一激发三重态的最低振动 能级→基态（ T1 → S0跃迁）； 电子由S0进入T1的可能过程：S0→T1禁阻跃迁 S0 →激发→振动弛豫→内转移→系间跨越→振动弛豫→ T1 发光速度很慢： 10-4～100 s 。光照停止后， 可持续一段时间。 ;（3）瑞利散射光和拉曼光;S2;二、分子荧光分析的基本原理;（2）.荧光光谱 (或磷光光谱 );;（3）.激发光谱 与发射光谱 的关系;;③.镜像规则;200;2、 荧光强度及其与浓度的关系;（2）荧光强度与浓度的关系;3. 荧光与分子结构的关系;②刚性平面结构;b 形成络合物后,形成刚性平面 滂铬兰黑R（BBR）无荧光，它与铝形成螯合物有荧 光。 ;c 取代基之间形成氢键;③取代基效应;b 吸电子基团会减弱甚至破坏荧光; c 邻位、对位取代增强荧光，间位取代抑制荧光。 d 重原子引入体系，荧光强度都很弱，而磷光强度相应增强。 e 与π电子体系作用小的取代基, 影响小。 ;④ 跃迁类型;;4、 影响荧光强度的主要因素;③转入三重态猝灭;③ 溶剂;第三节：荧光分析仪器;仪器光路图;一、基本装置及主要构件;2、单色器;5、检测器;磷光检测;第四节 荧光分析方法与应用;1．?标准曲线法 配制一系列标准浓度试样测定荧光强度，绘 制标准曲线，再在相同条件下测量未知试样的 荧光强度，在标准曲线上求出浓度 2、比较法 在线性范围内，测定标样和试样的荧光强 度，比较。 ;3、 多组分混合物的荧光分析;4、荧光分析注意事项;四、荧光分析法的应用;;;3、食品检测方面应用