2012 现代临床病理学实验技术.pptVIP

分子（病理学）诊断的定义 分子诊断的应用 间期FISH在常见肿瘤中的应用 淋巴造血系统肿瘤 淋巴瘤 白血病 ? 实体瘤 软组织肿瘤（肉瘤） 上皮组织肿瘤（癌） 乳腺癌、肺癌、前列腺癌等。 染色体异常表示符号及缩写 染色体异常表示符号及缩写 Her-2基因的检测方法 相对费用较高 对于低倍、高倍染色体非整倍性扩增检测准确性高，灵敏度特异性好，结果判断客观 Her-2 DNA FISH 对低度扩增及染色体非整倍扩增检测灵敏度下降 光镜即可观察结果 Her-2 DNA CISH 准确性差，主观性强，假阳性率高 费用低 光镜即可观察结果 Her-2蛋白 IHC 缺点 优点 检测指标 检测方法 正常: 2红/2绿 异常: 红信号大于2为异常细胞(绿色信号不少于2个的细胞) Her2： 17q11.2-q12 CSP17: 17p11.1q11.1 红/绿 Her2 /CSP17 乳腺癌 探针定位 标记颜色 探针 疾病 名称 FISH检测Her-2基因的探针 DAPI染色后与HE切片对比图 浸润部分 导管内癌 结果判断 统计Ratio值（计数浸润性部分的20个细胞） 结果判断 Ratio值＝20个细胞核中红信号总数/绿信号总数 Ratio＜1.8 为阴性结果 Ratio＞2.2或众多信号连接成簇时可不计算为阳性结果 比值2～4为低度扩增 4～10为中度扩增 10为高度扩增 Ratio在1.8-2.2 之间时，则需要再计数20个细胞核中的信号。如仍为临界值，则应在FISH检测报告中注明。 Her-2基因无扩增情况 红信号数2，同时绿信号非整倍体R1.8，无扩增 红信号与绿信号均为两点，R=1 A. 无须计数的大簇团信号（高度扩增） B. 颗粒状信号（R10，高度扩增） C. 须计数的颗粒状信号（R=3.5，低度扩增） A C B Her-2基因扩增状况 Her2基因检测流程 石蜡组织标本 IHC检测 再用FISH 方法检测 — 1+ 3+ 2+ — + Herceptin治疗 + 再用FISH 方法检测 Herceptin治疗 FISH检测 + — 再用FISH 方法检测 + IHC Images courtesy of M. J. Kornstein, M.D., Medical College of Virginia. Note: Not matched specimens. Her-2/neu的检测方法 高扩增 1+ 2+ 阴性/0 正常 3+ 低扩增 正常 1）简单易行，可以与形态学对照,应用广泛。 2）敏感性高、特异性强。避免假阴性和假阳性； 3）材料易于获得且节约标本； 4）节约时间（2~3天）。 5）好的探针是保证。每个探针都要建立cut-off 值。 间期FISH的特点 q Long arm of a chromosome，长臂 ? p Short arm of a chromosome，短臂 , Separates chromosome modal number, sex chromosomes, and chromosome abnormalities，分隔符号 ? tri Trisomy，三体型 ? ter Terminal end of arm (i.e. 2qter - end of the long arm of chromosome 2)，末端 ? t Translocation，易位 ? r Ring chromosome，环形染色体 ? mar Marker chromosome (unidentifiable piece of chromosome)，标记染色体 ? del Deletion，缺失 inv Inversion 倒转 ? ins Insertion of a portion of a chromosome 插入 ? der Derivative chromosome (used when only one chromosome from a translocation is present, or when one chromosome has two or more structural abnormalities)衍生染色体 ? -???? Loss of a chromosome 染色体丢失 ? + Gain of a chromosome染色体获得 ? dic Dicentric chromo