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超分辨荧光成像技术解析;光学显微镜的衍射极限;;光学显微镜分辨率极限的突破;超分辨荧光显微技术分类;一、受激发射损耗技术(STED)
Stimulated Emission Depletion Microscope;STED设想的提出;STED技术原理;STED的缺点:损耗光需要很强的亮度,激光器造价昂贵,对样品损伤较大,并且操作相当繁琐,一次只能看一块很小很小的区域,效率低。;二、结构光照明显微镜SIM, Structured Illumination Microscopy;花粉粒的细微结构
;对绿色荧光蛋白标记的活体转基因斑马鱼胚胎进行成像,获得斑马鱼侧线原基的动态变化。红框中为一正在分裂的细胞。;三、单分子显微技术;1、随机光学重构显微技术 STORMstochastic optical reconstruction microscopy;;单分子定位;通过重复扫描目标样本,每次拍摄时只让少量分子发光,最后把所得图像重叠在一起得到突破“衍射极限 ”的高分辨率显微影像。;;STORM 3D成像实例;2、光活化定位显微镜PALMPhotoactivated Localization Microscopy;PALM基本原理;;原理;;
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