硫化氢抑制atf6-hydrogen sulfide inhibits at f6.docxVIP

学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本人独立完成的研究成果。文中依法引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。本人如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：1．交回学院授予的学位证书；2．学院可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报；3．本人按照学院规定的方式，对因不当取得学位给学院造成的名誉损害，进行公开道歉。4．本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名：日期：年月日学位论文知识产权权属声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属学院。学院享有以任何方式发表、复制、公开阅览、借阅以及申请专利等权利。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为青海大学。论文作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日（本声明的版权归青海大学所有，未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用）摘要目的：研究硫化氢在大鼠肝脏缺血再灌注损伤（IschemiaReperfusion，IR）中的保护作用及机制。方法：通过肝动脉结扎术构建大鼠缺血再灌注损伤模型，依次分为假手术组(Sham组)，缺血再灌注损伤组（IR组）及缺血再灌输损伤+硫化氢保护组（IR+NaHS组）；以TUNEL原位染色及流式细胞仪分析三组动物模型的肝细胞凋亡情况，检测肝细胞损伤指标ALT浓度，Realtime-PCR、Westernblots分析外源性硫化氢对内质网应急（Endoplasmicreticulumstress，ERS）信号通路关键分子活化转录因子6（activatingtranscriptionfactor6，ATF6）及促凋亡分子CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-bindingprotein-homologousprotein,CHOP)基因mRNA和蛋白表达的影响。结果：TUNEL原位凋亡及流式细胞仪分析结果显示，IR组大鼠肝细胞凋亡较假手术组明显增加（P0.05），而IR+NaHS组大鼠肝细胞凋亡较IR组明显减少（P0.05）；大鼠肝细胞损伤标志物谷丙转氨酶ALT在IR组较假手术组明显增加，但IR+NaHS组较IR组大鼠血清中ALT下降明显，差异有统计学意义；IR组大鼠肝组织ATF6、CHOPmRNA及蛋白表达较假手术组明显增加，IR+NaHS组ATF6及CHOPmRNA及蛋白表达较IR组明显减少（P0.05）。结论：成功构建SD大鼠肝脏缺血再灌注损伤的模型；硫化氢通过抑制内质网应急关键信号通道ATF6-CHOP基因表达，进而产生对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。关键词：缺血再灌注损伤硫化氢肝脏IAbstractObjectives:Tostudytheeffectofhydrogensulfideonischemia-reperfusioninjury(IR)intheratliveranditsmechanism.Methods:Afterconstructingthemodelofhepaticischemia-reperfusioninjurythroughthehepaticarteryligation,thenthemodelwasdividedintothreegroups:shamoperationgroup(Shamgroup),ischemia-reperfusioninjurygroup(IRgroup)andischemicinjury+hydrogensulfideprotectiongroup(IR+NaHSgroup);ThelivercellapoptosisinthethreegroupswereanalyzedbyusingTUNELsitustainingandflowcytometry,aswellasdetectingthecellinjuryindicator-ALTconcentration.Realtime-PCR,Westernblotswereusedtoanalyzetheeffectofexogenoushydrogensulfideonthegeneandproteinexpressionofactivatingtranscriptionfactor6(ATF6)andCCAAT/enhancer-bindingprotein-homologousprotein(CHOP),whichwerethekeymoleculesofendoplasmicreticulumemergency(ERS)signalingpathway.Results:TUNELinsituapoptosisandflowc