2017-2018学年高中生物浙科版（浙江专版）选修3教学案：第一章+第二节+基因工程的原理和技术+Word版含答案.docVIP

第二节基因工程的原理和技术 一、基因工程的基本原理 1．基本原理：让人们感兴趣的基因(即目的基因)在宿主细胞中稳定和高效地表达。 2．基因工程的变异类型：基因工程属于可遗传变异中的基因重组。 3．变异特点：实现性状定向改造。 二、基因工程的基本操作步骤 1．获得目的基因 (1)目的基因：人们所需要的基因，如人的胰岛素基因、植物的抗病基因等。 (2)获取方法： ①如果目的基因的序列是已知的，可用化学方法合成目的基因，或者用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因。 ②如果目的基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一个包括目的基因在内的基因文库，从基因文库中找到目的基因。 2．形成重组DNA分子 (1)通常用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA(如质粒)，形成相同的粘性末端。 (2)用DNA连接酶将目的基因和载体DNA连接在一起，形成重组DNA分子。 3．将重组DNA分子导入受体细胞 (1)常用的受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 (2)导入方法举例：用质粒作为载体，宿主细胞应该选择大肠杆菌，用氯化钙处理大肠杆菌，增加其细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。 4．筛选含有目的基因的受体细胞 (1)筛选原因：并不是所有的细胞都接纳了重组DNA分子。 (2)筛选方法举例：质粒上有抗生素如四环素的抗性基因，所以含有这种重组质粒的受体细胞就能够在有四环素的培养基中生长，而没有接纳重组DNA分子的细胞则不能生长，这样就能筛选出含有重组DNA分子的受体细胞。 5．目的基因的表达 目的基因在宿主细胞中表达，产生人们需要的功能物质。 1．基因工程主要操作步骤的顺序是(　　) ①目的基因表达　②筛选含有目的基因的受体细胞　③重组DNA分子导入受体体细胞　④形成重组DNA分子　⑤获得目的基因 A．⑤③②④①　 　　　　　B．⑤②④①③ C．⑤④③②① D．⑤③④①② 解析：选C　基因工程的主要操作步骤顺序是：获得目的基因→形成重组DNA分子→重组DNA分子导入受体体细胞→筛选含有目的基因的受体细胞→目的基因表达。 2．下列不属于目的基因获得方法的是(　　) A．化学合成 B．PCR扩增 C．从基因文库中获取 D．翻译 解析：选D　翻译的产物是蛋白质，不是DNA。 3．基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞的主要原因是(　　) A．结构简单，操作方便 B．繁殖速度快 C．遗传物质含量少，易操作 D．性状稳定，变异少 解析：选B　目的基因导入受体细胞后，随着受体细胞的繁殖而复制，由于细菌等微生物繁殖速度非常快，在很短的时间内就能获得很多的目的基因的产物。 4．在基因工程技术中，可能需要用到CaCl2处理的环节是(　　) A．目的基因的提取和导入 B．目的基因与载体结合 C．将目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测与鉴定 解析：选C　将目的基因导入原核生物受体细胞时，首先用Ca2＋处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后在一定条件下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化。5．科学家用纳米技术制造出一种“生物导弹”，可以携带DNA分子。把它注射入组织中，可以通过细胞的内吞作用进入细胞内，DNA被释放出来，进入到细胞核内，最终整合到细胞染色体上，成为细胞基因组的一部分，DNA整合到细胞染色体中的过程属于(　　) A．基因突变 B．基因重组 C．基因互换 D．染色体畸变 解析：选B　基因突变是基因内部结构的改变；染色体畸变是指染色体结构和数目变化；基因工程是将外源基因导入受体细胞，得到人们所需要的产物，属于基因重组。 1．获取目的基因方法的比较 前提条件 获得方法 过程 优点 缺点 目的基因 序列已知 化学合成 用单个的游离的核苷酸聚合而成 专一性强 仅限于比较简单的基因 PCR扩增 在体外通过TaqDNA聚合酶的作用进行DNA复制 循环往复、大量扩增 要求条件高、易出错 目的基因序列未知强 从基因文库中获取 构建DNA分子中所有基因组成基因文库，从中寻找目的基因 可操作性 需从大量材料中寻找 2．形成重组DNA分子 (1)用同一种限制酶切割目的基因和质粒，使其产生相同末端。 (2)将切下的目的基因片段与切开的质粒混合，再加入适量DNA连接酶，使目的基因插入质粒的切口处，形成一个重组DNA分子(重组质粒)。构建过程如下图所示： (3)用到的工具酶：限制性核酸内切酶和DNA连接酶。 (4)理论基础：碱基互补配对原则和DNA双螺旋结构。 (5)形成的重组DNA分子特点：既有目的基因又有标记基因。 3．将重组DNA分子导入受体细胞 (1)常用的受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 (2)将目的基因导入受体细胞的方法比较： 4