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辽宁产东亚钳蝎毒中枢镇痛作用
辽宁产东亚钳蝎毒中枢镇痛作用
摘 要:目的:探究辽宁产东亚钳蝎毒镇痛作用的部位。方法:随机对照实验。选用杂交短毛猫45只,体重2.2~3.0kg,雌雄不拘,随机将实验用猫分为2组:实验组30只、对照组15只。动物麻醉后分离内脏大神经,结扎离中断。参照脑立体定位图定位尾状核、中脑导水管灰质及杏仁内侧核插入玻璃微电极于丘脑后核做引导电极,与ATAC-350数据处理机、X-Y记录仪相连,记录丘脑后核群的单位诱发电位。实验组注射蝎毒镇痛活性肽0.002 mg;对照组注射0.002 mg生理盐水。结果: 造模成功的28只实验用猫及对照组12只实验用猫进行结果分析。实验组丘脑后核群诱发电位出现抑制时间变化明显,对照组丘脑后核群诱发电位变化不明显(P0.05),差异有非常显著性意义(P0.05),差异无显著性意义(P0.05)。结论:蝎毒镇痛作用是由尾状核、中脑导水管周围灰质及杏仁内侧核等引起的。
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关键词:东亚钳蝎;立体定位;电解损毁;微电极记录法;核团内注射
中图分类号:R282.740.5文献标识码:A
文章编号:1673-7717(2008)05-1104-02
电解损坏核团技术是研究中枢神经系统各部位功能及相互联系的重要手段之一。本研究损坏猫尾状核(Nucleus Caudatus,CD),中脑导水管周围灰质(Periaque-ducatal gray,PAG),及杏仁内侧核(Nucleus amygdalae medialis,AME),观察损坏诸核前、后丘脑后核(Posterior nucleus group of thalamus,P.O)内脏大神经诱发放电的变化。以了解辽宁产东亚钳蝎毒镇痛作用的部位。
有研究表明蝎毒素有很强的中枢镇痛作用,对内赃痛也有一定的镇痛作用。以猫丘脑后核内脏大神经诱发单位放电为内脏痛指标,观察向尾状核、中脑导水管周围灰质及杏仁内侧核内注入东亚钳蝎毒及在电解损毁3个核团前后PO内脏大神经诱发单位放电的变化。在损毁诸核之前刺激内脏大神经引起单位诱发放电。损毁诸核之后诱发放电减弱或消失,这与辽宁产东亚钳蝎毒注入诸核团中的作用相一致,表明蝎毒的作用部位与上述核团有关。?
1 实验材料
实验于2006-12/12在沈阳医学院生理实验室完成。
实验选用健康杂交短毛猫[沈阳医学院动物室提供???许可证号:scxk(辽)2003-0016]45只,雌雄不拘,猫龄3~4个月,体重2.2~3.0kg,清洁级。随机分为实验A组30只(其中尾状核实验组10只,中脑导水管周围灰质实验组10只及杏仁内侧核实验组10只),B组为生理盐水对照组15只 (其中尾状核对照组5只,中脑导水管周围灰质对照B组5只及杏仁内侧核对照组5只)。实验过程中动物的处置符合动物伦理学要求。
蝎毒镇痛活性肽(SAP):是辽宁产东亚钳蝎毒经sephadex柱层析反复分离纯化而成的多肽物质,SAP为1 mL/支(由沈阳药科大学实验室提供)。?
2方法?
2.1 实验组
①动物静脉注射1%氯醛糖(60mg/Kg)浅麻醉,暴露气管,气管插管后于腹膜外暴露左侧内脏大神经,结扎其离中端,以备刺激。②将动物相当于丘脑后核(P.O)(右AP 0-10、旁开LR 0-1.0、H 3.0-4.0)处施颅骨开孔,以备插入电极。③将尾状核实验动物组在相当于尾状核处(AP 5.0-19.0、LR 2.0-8.5、H 1.0-9.0)施颅骨开孔,以备插入电极。同样方法将中脑导水管周围灰质实验组及杏仁内侧核实验组分别在相当于中脑导水管周围灰质(PAG)(AP 0-2.0、LR 0-3.0、H 1.8-3.0)、杏仁内侧核 (AME)(AP 10.5-14.0、LR7.0-9.0、H 4.0-6.5)等处施颅骨开孔,以备插入电极。同时在第四脑室引流以降低脑压,动物清醒后,静脉注射三碘季胺酚(6mg/kg),使动物无动化,在人工呼吸条件下进行观察。④将动物置于屏蔽室内,用微电极推进器将尖端直径约1~2μm的玻璃微电极,插入各组动物右侧脑的P.O区,通过微电极放大器连于示波器上,并与磁带记录仪,医用数据处理机,X―Y记录仪相连,记录P.O的单位诱发放电。⑤将动物分别在双侧CD、PAG、AME放入单极电极作为损毁电极备用。⑥给内脏大神经施加强度20~25V,波宽0.5ms,延时20ms的单一方波刺激,间隔时间5min,用X-Y记录仪描绘图形。⑦注射蝎毒镇痛活性肽0.002mg;结束后再各损毁5例,损毁电流强度3mA,损毁时间1min,用X-Y记录仪描绘图形。?
2.2 对照组
①~⑥同实验组,⑦对照组注射0.002 mg生理盐水。
实验结束时用
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