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银杏叶提取物抗肝纤维化作用研究 　　摘要：目的:探讨银杏叶提取物（GbE）对实验性大鼠肝纤维化的防治作用。方法：采用CCl4诱导大鼠肝纤维化，同时分别以200、100、50mg/（kg#8226;d）的GbE进行干预，并设复方鳖甲软肝片为阳性对照组，6周后取血和肝组织，全自动生化仪检测血清ALT、AST、ALP含量，放免法检测血清HA、LN水平，HE及Masson染色观察肝组织炎症活动度及肝纤维化程度。结果：GbE高、中、低剂量组及复方鳖甲软肝片组肝纤维化大鼠血清ALT、AST、ALP及HA、LN的含量能明显降低，肝组织炎症活动度及肝纤维化程度改善。结论：GbE有明显的抗肝细胞损伤、促进肝功能恢复的作用，对大鼠实验性肝纤维化具有较好的防治作用。 　　关键词：银杏叶提取物；肝纤维化 　　中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2008)04-0779-03 　　 　　银杏叶提取物(Ginkgo Biloba extract，GbE)是从银杏科植物银杏的叶中分离纯化的提取物，主要成分为黄酮甙和银杏内酯，有清除氧自由基、抑制脂质过氧化、改善微循环等药理作用[1]。本实验采用CCl4 诱导大鼠肝纤维化模型，以不同剂量的GbE进行干预，同时设具有益气养血、化瘀解毒、软坚散结功效，临床用于防治肝纤维化的有效复方中药制剂复方鳖甲软肝片为阳性对照，观察GbE的抗肝纤维化的作用。 　　 　　1材料与方法 　　 　　1.1实验动物SD大鼠60只，雄性，清洁级,体重190~210g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供,许可证号：SCXK(沪)2003-0003。 　　1.2主要药品与试剂CCl4为上海凌峰化学试剂有限公司产品，批号050615；橄榄油为北京京都利德食品有限公司产品(西班牙百叶公司)，批号GbE为西安中鑫生物技术有限公司，批号050118，其中黄酮苷24.03%、银杏内酯6.15%；复方鳖甲软肝片为内蒙古福瑞中蒙药科技股份有限公司产品，批丙氨酸氨基转移酶（ALT）批号557-27173-01、天冬氨酸转氨酶（AST）批号4704-23872-2A、碱性磷酸酶（ALP）批号6900-32207-01，上述3个试剂盒均为上海申能-德赛诊断技术有限公司产品；HA、LN放免试剂盒均为北京北方生物技术研究所产品，批号均 　　1.3主要实验仪器SN-695智能放射免疫γ测量仪为上海原子核研究所日环仪器厂生产，日立7020全自动生化仪为日本高新技术株式会社生产。 　　1.4肝纤维化模型建立 CCl4以橄榄油配制成40%浓度(V/V)，皮下注射0.3mL/100g体重,每周2次，首次加倍，连续6周建立肝纤维化模型，正常组以等容量的橄榄油皮下注射。 　　1.5实验分组及处理60只SD大鼠随机分成6组，每组10只，正常组每周2次用橄榄油皮下注射，同时每天灌服等容量的蒸馏水；模型组在造模同时每天灌服等容量的蒸馏水；GbE高、中、低剂量组在造模同时每天分别灌服GbE混悬液200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg；复方鳖甲软肝片组在造模同时每天灌服复方鳖甲软肝片混悬液1g/kg，均连续6周。所有大鼠予以标准大鼠饲料喂养，自由饮水。末次给药当晚大鼠禁食不禁水，次日上午空腹用3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉, 腹腔静脉取血，分离血清，-20℃保存待用，取肝右叶小块肝组织，用4%多聚甲醛固定，逐级酒精脱水，常规石蜡包埋用于病理检查。实验期间GbE中剂量组1只大鼠因灌胃针不慎刺破食管死亡。 　　1.6指标检测与方法血清ALT、AST、ALP采用全自动生化仪测定；血清HA、LN采用放免法测定；肝组织病理学检查常规HE及Masson染色光镜下观察肝组织病理学变化，参照王泰龄[2]等制订的慢性肝炎炎症活动度及肝纤维化程度计分方案进行评分。 　　1.7统计处理实验数据以均数±标准差（ ±s)表示，使用SPSS10.5软件进行统计学分析，以P0.05）；见表1。 　　 　　2.2GbE对肝纤维化大鼠血清HA、LN的影响模型组大鼠血清HA、LN含量较正常组明显升高(P 　　银杏叶提取物(extract of Ginkgo bibloba,GbE)是从银杏科植物银杏的叶中分离纯化的提取物, 其中黄酮苷是GbE的主要活性成分，其母核中含有还原性羟基功能基团，可清除O2-#8226;OH、H2O2等氧自由基，并能捕获脂质自由基、脂过氧自由基、脂氧自由基和烷自由基等基团，终止自由基连锁反应链从而抑制氧自由基反应和脂质过氧化反应，抑制MDA、共轭二烯等毒性物质的生成，增强自由基反应酶类如过氧化物歧化酶(S0D)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH―PX