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内皮祖细胞移植对扩张型心肌病大鼠血管新生影响 　　[摘要] 目的 探讨内皮祖细胞(EPC)对扩张型心肌病大鼠心肌内血管新生的影响。方法 50只雌性SD大鼠于腹股沟皮下注射异丙肾上腺素,250mg/kg,连续2d,制作扩张型心肌病(DCM)模型。随机分为EPC治疗组和对照组;心脏彩超评估心功能情况免疫组化方法检测心肌细胞内的血管密度。结果 细胞移植3个月后EPC组心肌内血管密度高于对照组。结论 心肌内移植EPC是治疗扩张型心肌病的有效方法,安全,可行。 　　[关键词] 内皮祖细胞;扩张型心肌病;血管新生 　　[中图分类号] R542.2 [文献标识码] A[文章编号] 1673-9701(2010)12-09-02 　　 　　The Effects of Endothelial Progenitor Cells on Neovascularization for Dilated Cardiomyopathy Rats 　　ZHANG XinWANG DeqiangZHENG YuyunGUO Xiaohua 　　Department of Cardiology,the First Affiliated to Baotou Medical College,Baotou 014010,China 　　 　　[Abstract] Objective To study effects of endothelia progenitor cells(EPCs) on neovascularization for dilated cardiomyopathy(DCM) rats. Methods Fifty adult female rats received inguinal subcutaneous injections of isoproterenol(ISO,250mg/kg) for induction of DCM. And the model rats were randomly divided into EPCs group and control group. The echocardiographic examination and myocardial capillary density were performed. Results Three months after transplantation,there was higher capillary density in EPCs group. Conclusion Transplantation of EPCs can improve cardiac function,induce neovascularization for DCM. The treatment with EPCs has better effect. 　　[Key words] Endothelia progenitor cell;Dilated cardiomyopathy;Neovascularization 　　内皮祖细胞(EPC)是能够分化为内皮细胞的干细胞。众多国内外研究表明,EPC能够修复受损血管的内膜并在缺血部位形成血管[1]。EPC通过分化、增殖,并融合到原有血管的内膜层,促使新的血管网的形成[2],也能通过分泌多种细胞因子影响其周围细胞的生物行为。扩张型心肌病典型的病理改变是心肌细胞丢失、微循环受损和心肌纤维化。本研究的目的是将内皮祖细胞移植到扩张型心肌病大鼠的心肌内,观察内皮祖细胞对其心肌内血管新生的影响,为干细胞广泛应用于临床提供依据。 　　1材料和方法 　　1.1动物模型的制作 　　50只雌性和12只雄性成年SD大鼠购于中国科学院实验动物中心,??重170~ 220g,用于动物模型和细胞提取。将异丙肾上腺素(Sigma)用0.9%生理盐水溶解,注射到大鼠腹股沟皮下,250mg/kg,每天1次,连续2d。所有大鼠术后分笼饲养4周,在室温(24±1)℃的环境中自由进食和活动。 　　1.2骨髓单个核细胞的分离和内皮祖细胞的培养 　　12只正常雄性SD大鼠用过量氯胺酮(200mg/kg)麻醉处死,单个核细胞提取根据文献提到的方法[2]。简而言之,在无菌条件下,用0.9%生理盐水反复冲洗胫骨、股骨的骨髓腔,用Ficoll -Paque(1.077g/mL,华精,上海)通过梯度密度离心法提取单个核细胞。细胞经过三步洗涤后,用EGM-2培养液(Clonetics,USA)将细胞密度调整为0.5×106/mL,然后均匀地铺在包被了纤维连结蛋白(10μg/mL,Chemicon,美国)的六孔板中,放于37℃,5% CO2的培养箱中,每周更换2次培养液。