荧光探针设计原理.docVIP

荧光化学传感?器是建立在光?谱化学和化学?波导与量测技?术基础上的将?分析对象的化?学信息以荧光?信号表达的传?感装置。其主要组成部?件有三个(图1．1)：1．识别结合基团?(R)，能选择性地与?被分析物结合?，并使传感器所?处的化学环境?发生改变。这种结合可以?通过配位键，氢键等作用实?现。2．信号报告基团?(发色团, F)，把识别基团与?被分析物结合?引起的化学环?境变化转变为?容易观察到的?输出信号。信号报告基团?起到了信息传?输的作用，它把分子水平?上发生的化学?信息转换成能?够为人感知(颜色变化)或仪器检测的?信号(荧光等)。3．连接基团(S)，将信号报告基?团和识别结合?基团连接起来?，根据设计的不?同连接基团可?有多选择，一般用做连接?基团的是亚甲?基等短链烷基?。连接基团的合?适与否将直接?影响是否有输?出信号的产生?。信号表达可以?是荧光的增强?或减弱、光谱的移动、荧光寿命的变?化等。 图1.1 荧光探针的结?构 1.1 荧光探针的一?般设计原理 1) 结合型荧光探?针[21] 图1.2 共价连接型荧?光探针 针是利用化学?共价键将识别?基团和荧光基?团连接起来的?一类荧光探针?，是比较常见的?一类荧光探针?。该类探针通过?对比加入分析?物前后荧光强?度的变化、光谱位置的移?动或荧光寿命?的改变等实现?对分析物的检?测。在该类荧光化?学传感器的设?计中，必须充分考虑?下列三个方面?的因素。(a) 受体分子的荧?光基团设计、合成：考虑到用于复?杂环境体系的?荧光检测，要求荧光基团?要有强的荧光?（高荧光量子产?率，有利于提高检?测的灵敏性），Stokes? 位移要大（可有效消除常?规荧光化合物?如荧光素等具?有的自猝灭现?象），荧光发射最好?要在长波长区?（最好位于50?0 nm 以上，可避免复杂体?系的常位于短?波长区的背景?荧光的干扰，另外由于长波?长区发射的荧?光能量的降低?可减少荧光漂?白现象的发生?而延长传感器?的使用寿命）。(b) 受体分子的识?别基团：受体分子的识?别基团设计以?软硬酸碱理论?、配位作用以及?超分子作用力?（如氢键、范德华力等）作为理论指导?，多选择含氮、硫、磷杂环化合物?作为识别分子?。(c) 荧光超分子受?体的组装：组装荧光超分?子受体就是利?用一个连接基?将识别基团和?荧光基团通过?共价键连接在?一起，要充分考虑到?识别基团和荧?光基团之间能?通过连接基进?行信号传递，对识别对象的?识别信息（如荧光的增强?或减弱、光谱的移动、荧光寿命的变?化等）可以及时传递?出去。 图1.3 共价连接型锌?离子荧光探针?De Silva 在1997年?报道的化合物?1 [22]是一个典型的?共价连接法设?计的荧光探针?。它分别以有优?良光学性质的?蒽作为荧光基?团，以对Zn2+有特异性识别?的基团双( 2-吡啶甲基)氨 (DPA)为识别基团，通过亚甲基将?光报告基团连?接在一起。通过对比加锌?前后荧光强度?的不同实现了?对锌离子的检?测。 2) 置换型荧光探?针 图1.4 置换型荧光探?针利用该方法设?计的荧光探针?是通过识别基?团分别与荧光?指示剂和被分?析物结合能力?的强弱来实现?对被分析物的?检测。该类传感器对?识别基团和荧?光指示剂的要?求都比较高，既要选择能和?识别基团结合?但结合能力又?不是特别强的?荧光指示剂，又要设计对被?分析物能特异?识别的识别基?团。该类设计方法?多用于阴离子?传感器的设计?。 2002 年，Kim小组[23]设计了邻苯二?酚紫作为荧光?指示剂，双锌配合物为?HPO42- 识别基团，并将二者自组?装成化合物2?，用于中性条件?下水溶液中H?PO42-的检测。加入识别客体? HPO42- 后，由于 HPO42- 与双锌配位能?力强于邻苯二?酚紫，从而把邻苯二?酚紫挤开，使之进入溶液?，表现为其原来?颜色。在识别过程中?，溶液颜色从蓝?色变为黄色，常见的 Ac-、CO32-、NO3-、N3-、ClO4-、S2-、F-、Cl-、Br-都不影响 HPO42- 的检测，表现出较好的?选择性。 图1.5 置换型HPO?42-化学传感器 化学计量型荧?光探针（chemod?osimet?er） 化学计量型荧?光探针分子是?利用探针分子?与识别客体之?间特异不可逆?的化学反应前?后产生荧光信?号的不同而对?分析对象进行?检测的一类探?针[24]。主要包括两种?类型：一类是目标离?子和探针分子?发生化学反应?后仍旧通过共?价键相连接:另一类是目标?离子催化了一?个化学反应（图1.6）。 图1.6 化学计量法的?两种类型 一般而言，化学计量型荧?光探针分子都?具有专一性和?不可逆性。尽管这类探针?已有不少报道?,但由于设计较?为困难和反应?不够灵敏等缺?陷而进展较为?缓慢。