2.2-微生物发酵产酶.pptVIP

固定化原生质体:固定化细胞只能用于生产胞外酶等容易分泌到细胞外的产物,细胞中许多物质由于细胞壁的存在,不能分泌到细胞外，为了除去细胞壁这一扩散障碍，使较多的细胞内物质分泌到细胞外 固定化细胞的缺点: 只能用于生产胞外酶和其他能够分泌到细胞外的产物 由于载体的影响，使营养物质和产物的扩散受到一定的限制 在好气性发酵中，溶解氧的传递和输送成为关键性的限制因素 原生质体固定化的必要性及优点: 原生质体很不稳定，容易破裂 有可能增加细胞膜的通透性，可使较多的胞内物质分泌至细胞外，实现某些胞内产物的生产 由于去除了细胞壁这一扩散障碍，有利于氧的传递，营养成分的吸收和胞内产物的分泌 一、原生质体的制备 制备时的注意点: 在破坏细胞壁的时候，不能影响到细胞膜的完整性，更不能使细胞内部的结构受到破坏，因此只能使用对细胞壁有专一性作用的酶 不同种类的细胞，由于各自细胞壁的组成、结构和性质不同，原生质体的制备方法也不一样 为防止原生质体破裂，需加合适的渗透压稳定剂 选对数生长期的细胞以获得高的原生质体形成率 须经过试验确定细胞壁溶解酶的最佳作用条件 常用制备过程 将对数生长期的细胞收集起来，悬浮在含有渗透压稳定剂的高渗缓冲液中 加入适宜的细胞壁水解酶，在一定的条件下作用一段时间，使细胞壁破坏 分离除去细胞壁碎片、未作用的细胞以及细胞壁水解酶，得到原生质体 渗透压稳定剂(无机盐,糖类,糖醇):