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- 2018-06-05 发布于河南
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REMI转化体的质粒拯救
REMI转化体的质粒拯救
限制性内切酶介导的整合(Restriction Enzyme Mediated Integration,REMI)技术是一种将待转化的DNA通过限制性内切酶介导整合到真核生物细胞染色体中的方法,在真菌中已经发展成为有效的转化和标记突变的方法。用REMI技术已经标记和分离出几种植物病原真菌的致病性相关基因。如玉米小斑病菌Cochliobolus heterostrophus T小种的产毒素基因Tox1和T毒素生物合成所需要的直线聚乙酮醇(1inear polyketide)合成酶基因PKS1(Lu et al.1994; Yang et al. 1996);梨黑斑病菌Alternaria alternata日本梨致病型菌株中与AK毒素产生和致病性必需的2个基因Akt1和Akt2(Tanaka et al. 1999)等。在稻瘟菌中,利用REMI技术已克隆了10多个致病相关基因,如Pth11、CUT1、MPG1、CPKA等(DeZwaan et al., 1999; Sweigard et al., 1998; Lau and Hamer, 1998; Xu et al., 1997; Balhadere et al., 1999)。
在稻瘟菌的REMI转化以获得突变体中,转化用的质粒以随机的方式插入到稻瘟菌的基因组中,这个质粒除了带有一个真核选择标记如潮霉素
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