细胞生物学重点1.docVIP

单克隆抗体技术：把小鼠骨髓瘤细胞与经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞（B淋巴细胞）在聚乙二醇或灭活的病毒的介导下发生融合。融合后的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，一方面可分泌抗绵羊红细胞的抗体，另一方面像肿瘤细胞一样，可在体外培养条件下或移植到体内无限增殖，从而分泌大量单克隆抗体。 细胞拆合：把核与质分离开来，然后把不同来源的细胞质和细胞核融合，形成核质杂交 细胞。 3．生物膜：细胞内的膜系统与细胞膜统称为生物膜。 4．生物膜特性： （1）镶嵌性：基本结构是由磷脂双分子层构成的网架上镶嵌以蛋白质； （2）流动性：构成膜的蛋白质分子和脂类分子在膜中的位置不是静止不动的。 （3）不对称性：膜两侧的分子结构和性质不同； （4）蛋白质极性：膜整合蛋白多肽链的极性区露出膜表面，而非极性区埋在脂双层的内部，故蛋白质分子既与水溶性分子结合，也可与脂溶性分子亲和。 4．．细胞膜研究上的几种重要学说 E.Gorter和F．Grendel（1925）:质膜的双层脂分子结构 Davson和Danielli（1935）：双分子片层模型（Danielli－Davson模型）：“蛋白质-脂类-蛋白质”三夹板质膜结构模型 J.D.Robertson（1959年）： 单位膜模型(unit membrane model) S.J.Singer和G.Nicolson（1972）： 生物膜的流动镶嵌模型 (fluid mosaic model) 液晶镶嵌模型和板块镶嵌模型 脂筏模型（lipid rafts model） 5．．磷脂：膜脂的基本成分（50％以上） 分为二类: 甘油磷脂和鞘磷脂 主要特征：①具有一个极性头部和两个非极性的尾部（心磷脂除外）；②脂肪酸碳链碳原子为偶数,大多数由16,18或20个组成；③饱和脂肪酸(如软脂酸)及不饱和脂肪酸(如油酸) 6．．胆固醇的作用：调节膜的流动性，增加膜的稳定性以及降低水溶性物质的通透性等都起着重要作用。 7．脂质体定义：脂质体是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。 8．膜蛋白类型：u内在（整合）膜蛋白，外在(周边)膜蛋白。 9．．去垢剂的作用及其类型：去垢剂是一端亲水一端疏水的两性小分子,是分离与研究膜蛋白的常用试剂。分为离子型去垢剂(SDS)和非离子型去垢剂，它不仅可使细胞崩解，并与膜蛋白疏水部分结合使其分离，而且还可以破坏蛋白内部的非共价键，甚至改变亲水部分的构象。 10．．成斑，成帽现象：在某些细胞中，当荧光抗体标记时间继续延长，已均匀分布在细胞表面的标记荧光灰重新排布，聚集在细胞表面的某些部位，即所谓成斑现象；聚集在细胞的一端，即成帽现象。 11．光脱色恢复技术：研究膜蛋白或膜脂流动性的基本实验技术之一。 ?用荧光素标记膜蛋白或膜脂，然后用激光束照射细胞表面某一区域，使其淬灭变暗。过一段时间，淬灭区域的亮度会恢复到与周围一样。 ? 进一步证明膜的流动性；根据荧光恢复的速度可推算出膜蛋白或膜脂扩散速度。 12．细胞膜各部分的名称：与细胞外环境接触的膜面称质膜的细胞外表面，与细胞质基质接触的膜面称质膜的原生质表面。样品经冰冻断裂处理后，细胞膜可从脂双层中央断开，各断面命名为：ES，细胞外表面（extrocytoplasmic surface）；EF，细胞外小页断面（extrocytoplasmic face）；PS，原生质表面（protoplasmic surface）；PF，原生质小页断面（protoplasmic face） 。 13．膜骨架：是质膜下纤维蛋白组成的网架结构。 14．细胞质膜的功能：（1）为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境; ? （2） 选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢产物的排除,并伴随着能量的传递; （3）提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息跨膜传递; （4）为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地进行; （5）介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接; （6）质膜参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构 15．膜骨架：是质膜下纤维蛋白组成的网架结构。 16．红细胞经低渗处理，细胞破裂释放出内容物，留下一个保持原形的空壳，称为血影（ghost） 17．细胞连接分类：封闭连接，锚定连接，通讯连接。 18．封闭连接结构： 19．桥粒是相邻细胞间形成的纽扣状结构。 铆接相邻细胞，提供细胞内中间丝的锚定位点，形成整体网络，起支持和抵抗外界压力与张力的作用。 通过质膜下的致密斑连接中间纤维；桥粒中间为钙粘素。 半桥粒：通过细胞质膜上的膜蛋白整合素将上皮细胞固着在基底膜上, 在半桥粒中，中间丝不是穿过而是终止于半桥粒的致密斑内。 20．粘着