蝮蛇毒介导的小鼠急性肝损伤及血清p-选择素水平的分析-analysis of acute liver injury and serum p - selectin level mediated by agkistrodon halys venom in mice.docxVIP

蝮蛇毒介导的小鼠急性肝损伤及血清 P-选择素水平的研究中文摘要目的：探讨蝮蛇毒介导的小鼠血清 ALT、肝脏病理变化及血清中 P-选择素水平的 变化与不同蝮蛇毒剂量、中毒时间的关系。方法：(1) 将 72 只清洁级昆明雄性小鼠采用两因素析因设计随机分成 9 组，每组 8 只 小 鼠 ， 蝮 蛇 毒 设 三 水 平 ： 0 剂量 (0.0mg/kg) 、 低 剂 量 (0.5mg/kg) 、 高 剂 量 (1.0mg/kg)；中毒时间设 3 水平：3 小时、8 小时、24 小时。(2) 采集小鼠血清及肝脏标本, 生化仪检测 ALT，观察肝脏病理变化，夹心法酶 联免疫吸附测定 P-选择素浓度。(3) 统计方法：实验数据使用 SPSS 13.0 统计软件进行统计学处理，计量资料以 均数±标准差（ x ±S）的形式表示，数据采用析因分析，两两比较采用 SNK 检验，相关性分析采用直线相关分析，P＜0.05 视为具有统计学意义。结果：(1) 肌注蝮蛇毒的实验组小鼠血清 ALT 值明显高于肌注生理盐水的对照组（P＜ 0.05）；高剂量组高于低剂量组（P＜0.05）；8h 组高于 3h 组（P＜0.05）；24h 组高于 8h 组（P＜0.05）；随着蝮蛇毒剂量的增加、中毒时间的延长血清 ALT 值越高。(2) 各时相点肝脏病变积分的统计分析，高剂量组病变积分高于低剂量组（P＜0.05）；8h 组病变积分高于 3h 组（P＜0.05）；24h 组病变积分高于 8h 组（P＜0.05）；随着蝮蛇毒剂量的增加、中毒时间的延长肝脏病变积分越高。(3) 测定血清中 P-选择素表达，实验组小鼠血清中 P-选择素表达明显增高（P＜ 0.05）； 高剂量组高于低剂量组（P＜0.05）；8h 组高于 3h 组（P＜0.05）；24h 组高于 8h 组（P＜0.05）；随着蝮蛇毒剂量的增加、中毒时间的延长血清中 P-选择素的表达越高。(4) 相关性分析：ALT 值与肝脏病变积分相关性分析，两者呈正相关(r＝0.92,P＜0.05)；血清中 P-选择素表达水平与肝脏病变积分相关性分析，两者呈正相关(r=0.98,P＜0.05)。结论：(1) 蝮蛇毒可以导致小鼠急性肝损伤，ALT 值升高，肝脏病变越严重，ALT 值升 高越明显。(2) 蝮蛇毒导致小鼠急性肝脏损伤，P-选择素表达增高,且随着蝮蛇毒剂量的增 加、中毒时间的延长，血清中 P-选择素的表达增高呈一定的时间、剂量效应 趋势，提示血清中 P-选择素表达增高可能是蝮蛇毒导致小鼠急性肝脏损伤的 机制之一。关键词：蝮蛇毒；小鼠急性肝损伤；P-选择素；丙氨酸氨基转移酶Study of Acute Liver Injury and Expression of P-selectin in serum of Mice Induced by Agkistrodon Halys Pallas Venom AbstractObjective: Explore the relationship between serum ALT, pathological changes of liver, expression of P-selectin in serum of mice and different dose of venom, the poisoning time induced by Agkistrodon Halys Pallas venom.Methods: (1)Using two-factor factorial design, the 72 male Kunming mice of clean grade were divided into 9 groups(n=8) randomly. Snake venom was divided into three levels: 0-dose(0.0mg/kg), low-dose (0.5mg/kg), high-dose (1.0mg/kg); Poisoning time to set up three levels : 3 hours, 8 hours, 24 hours. (2)Collected serum and liver specimens, detected of ALT by biochemical analyzer, investigated pathological changes of liver, detected expression of P-selectin by Enzyme-linked immunosorbent assay.(3) Statistical Methods: experimental data using th