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最新第六章发酵过程工艺
第六章 发酵工艺过程控制;发酵,原本是指在厌氧条件下葡萄糖通过酵解途径生成乳酸或乙醇等的分解代谢过程。 在广义的工艺上,则把发酵看做是微生物把一些原料养分在合适的条件下(通常是需氧)经特定的代谢转变成产物的过程。
发酵是一种很复杂的生化过程,发酵生产受许多因素的影响和工艺条件的制约。需要多年的经验才能掌握。
生产菌种的代谢规律和发酵调控的基本知识对稳定生产,提高产量意义重大。;微生物发酵的生产水平不仅取决于生产菌种本身的性能,而且要赋以合适的环境条件才能使它的生产能力充分表达出来;
必须了解有关生产菌种对环境条件的要求,如培养基、培养温度、pH、氧的需求等,并深入了解生产菌在合成产物过程中的代谢调控机制以及可能的代谢途径,为设计合理的生产工艺提供理论基础;
通过各种监测手段如取样测定随时间变化的菌体浓度,糖、氮消耗及产物,以及采用传感器测定发酵罐中的培养温度、pH、溶解氧等参数情况,并予以有效地控制,使生产菌种处于产物合成的优化环境中。;从产物形成来说,代谢变化就是反映发酵中的菌体生长、发酵参数的变化(培养基和培养条件)和产物形成速率这三者之间的关系。;1、分批发酵;分批培养过程中随着培养基中的营养物质不断减少,微生物生长的环境条件也不断变化,因此,微生物分批培养是一种非稳态的培养方法。;生长阶段;2、微生物分批培养生长速度的动力学方程
1942年,Monod提出了在特定温度、pH值、营养物类型、营养物浓度条件下,微生物细胞的比生长速率与限制性营养物浓度之间存在如下关系:
μ=μmaxS/(Ka+S)
μmax——微生物的最大比生长速率
S——限制性营养基质的浓度
Ks——饱和常数
;Monod方程的几点说明
a:分批培养过程的经验方程,在纯培养情况下,只有当微生物细胞生长受一种限制性营养物质制约时,与实验数据相一致。
b:K s反映了微生物对营养物质的吸收的亲和力的大小,数值越小,表明微生物对营养物质的亲和力大。反之则亲和力小。一般微生物的Ks值为0.1—120mg/L,是很小的。
c:μmax随微生物的种类和培养条件不同,一般来说细菌的μmax大于霉菌,就同种微生物来说,培养温度升高,μmax增大。;3、分批培养时微生物细胞的生长与产物形成的动力学
在发酵过程中,常用得率系数来描述微生物生长过程的特征,即生成的细胞或产物与消耗的营养物质之间的关系。
在实际中,最常用的是细胞得率系数
(Yx/s)和产物得率系数(Yp/s),分别定义为消耗1g营养物质生成的细胞的克数和生成产物的克数。
工业生产中可通过测定一定时间内细胞和产物的生成量及营养物质的消耗量来进行计算。;在分批培养过程中根据产物生成是否与菌体生长同步的关系,将微生物产物形成动力学分为① 生长关联型 和② 非生长关联型。;(1)有关分批发酵的几点讨论
生产的对象不同,掌握工艺的重点不同
产物为细胞本身——采用能支持最高生长量的培养条件
产物为初级代谢物——延长对数生长期
产物为次级代谢物——缩短对数生长期,延长稳定期
(2)分批发酵的优缺点
优点:操作简单,周期短,染菌的机会减少生产过程易于控制、产品质量易掌握。
x 缺点:分批发酵不适于测定过程动力学,存在基质的抑制问题,出现二次生长现象,对与一些对基质敏感的产物,由于养分易耗尽,产率较低。
;2、补料-分批发酵(fed-batch);可以解除底物抑制、产物反馈抑制和分解代谢物的阻遏;
可以避免在分批发酵中因一次投料过多造成细胞大量生长所引起的影响,改善发酵流变学的性质;
可用作控制细胞质量的手段,以提高发芽孢子的比例;
可作为理论研究的手段,为自动控制和最优控制提供实验基础。;(2)补料优化方式及控制;3、半连续发酵;4、连续发酵;连续培养系统又称为恒化器,培养物的生长速率受其周围化学环境,即受培养基组分的限制。
恒化器: 一种微生物连续培养器。它以恒定的速度流出培养液,使容器中的微生物生长繁殖始终低于最快生长速度。这种容器反映的是培养基的化学环境恒定。 ;连续发酵的缺点:
长时间的连续培养难以保证纯种培养,并且菌种发生变异的可能性较大,且易污染杂菌。故在工业规模上很少采用。生产上只有丙酮丁醇厌氧发酵、纸浆液生产饲料酵母、以及活性污泥处理各种废水等才使用连续培养工艺,此方法多数用于实验室以研究微生物的生理特性。;在发酵工艺中,要想控制发酵,使其按人的意志转移,是很难办到的。因为影响发酵的因素太多,有些因素还是未知的,但了解发酵工艺条件对过程的影响和掌握反映菌的生理代谢和发酵过程变化的规律,可以帮助人们有效地控制微生物的生长和生产。;第二节 发酵过程的主要控制参数;种子扩大培养;发酵工艺中几个最常用的控制点;一、温度对发酵的影响;1、影响发酵温度的因素;2、发酵热的测定;3、最适
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