高中生物同步课件31酶的制备及活力测定中图版选修1.pptVIP

栏目导引 新知初探思维启动 要点突破讲练互动 知能演练轻巧夺冠 第三章　 酶的制备及应用 第1节　酶的制备及活力测定 第1页/共30页 学习导航 1.研究酶的存在及提取方法。[重点] 2.尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。 [难点] 第2页/共30页 新知初探思维启动 一、酶的存在及影响因素 1.合成场所：在生物体活细胞中合成。 2.反应部位：多数在_______直接参与生物化学反应，少数在________发挥作用。 3.影响因素：_______________等多种环境条件都可能影响酶的__________,导致酶变性，直至丧失活力。 细胞内 细胞外 温度、酸碱性 空间结构 第3页/共30页 判一判 (1)人体内、参与物质分解的酶都可以在分泌物中提取。(×) (2)高温、低温、过酸和过碱等环境条件都能改变酶的空间结构，导致酶变性失活。(×) (3)新采摘的甜玉米放在沸水中浸泡后，可使甜味保持的时间长些。(√) (4)萨姆纳第一次证明了脲酶是蛋白质。(√) 第4页/共30页 二、酶的活力及测定方法 1.酶的活力：以单位时间内_______________或者在单位时间内_______________来表示。 2.酶活力的测定 (1)方法：利用______________进行比色。 底物的消耗量 产物的生成量 分光光度法 第5页/共30页 (2)实例 ①植物淀粉酶的制备及活力测定 使酶失活 第6页/共30页 钝化酶的活性使反应终止 3,5-二硝基水杨 酸试剂 煮沸 黄褐色 520m 第7页/共30页 想一想 进行酶活力测定时，出现了“恒温处理”、“沸水加热”、“钝化处理”，是否矛盾？各有什么目的呢？ 【提示】　不矛盾。恒温处理是为酶促反应提供必要的温度条件，与之形成对照的是经沸水浴加热变性失活的酶液，而钝化处理是使反应后的酶失活，使反应终止。 第8页/共30页 ②过氧化氢酶粗酶液的制备及活力测定 a．制备过氧化氢酶粗酶液 以新鲜动物肝脏、马铃薯块茎或萝卜块根为材料，经过切碎、研磨、_____，取_______即可得到过氧化氢酶粗酶液。 离心 上清液 第9页/共30页 b．分光光度法测定过氧化氢酶的活力 在过氧化氢酶存在时，过氧化氢将_________氧化生成_____色产物。待酶反应终止后，过滤，取滤液适当稀释，在波长_____ nm处测吸光值，计算出过氧化氢酶的活力。 愈创木酚 茶褐 470 第10页/共30页 c．高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶的活力 过氧化氢酶可以催化H2O2分解为水和氧。如果在反应系统中加入适当过量的过氧化氢溶液，经酶促反应后，在酸性条件下，用标准高锰酸钾溶液滴定多余的______,反应如下： 5H2O2＋2KMnO4＋4H2SO4―→5O2＋2KHSO4＋8H2O＋2MnSO4 H2O2 第11页/共30页 H2O2的量 第12页/共30页 要点突破讲练互动 要点一　粗酶液的制取 1.胞内酶(绝大多数酶，如呼吸酶、淀粉酶、过氧化氢酶等)：用破碎仪、研磨器或匀浆器等机械将组织细胞破碎，然后过滤、离心。 2.胞外酶(消化酶等)：直接从动物分泌物或组织间隙中提取。 第13页/共30页 H2O2酶粗酶液的制备过程中叙述错误的是(　　) A．以新鲜动物肝脏、马铃薯块茎或萝卜块根为材料 B．材料需要破碎、过滤和离心处理 C．取上清液即可得到粗酶液 D．粗酶液需要钝化处理保存 例1 第14页/共30页 【解析】　H2O2酶分布于很多组织细胞中，可有效地去除H2O2的危害，它属于细胞内的酶，所以要进行破碎或研磨，然后过滤、离心。但钝化处理是使酶失去活性的方法，不是保存方法。 【答案】　D 第15页/共30页 互动探究 (1)如果换成胰蛋白酶的制备，具体方法又是怎样？ (2)从哪些方面考虑酶液的保存？ 【提示】　(1)细胞外的酶可直接从分泌物中提取。 (2)酶液保存应考虑影响酶活性的因素，如低温、适宜pH等条件。 第16页/共30页 要点二　影响酶活力的因素 1.温度 酶活力随温度的变化而变化的趋势可用图示表示： 第17页/共30页 (1)温度从t1到t时，随着温度的升高，酶活力逐渐增强。 (2)温度从t到t2时，随着温度的升高，酶活力逐渐降低。 (3)温度高于t2时，酶活力全部丧失。 (4)t3、t4条件下，酶活力相同。 (5)t为最适温度，即在该温度时，酶的活力最强。 第18页/共30页 2.pH 每种酶都有一定的最适pH范围。例如：过氧化氢酶最适pH范围为6.8～7.3。过酸、过碱都会使酶发生不可逆失活。 第19页/共30页 3.酶的激活剂 有时加入酶的激活剂可以提高酶活力。 4.酶