钙池操纵性钙内流及其功能蛋白trpc orai和stim1在人非小细胞肺癌中的表达研究-expression of controlled calcium influx in calcium pool and its functional proteins trpc orai and stim 1 in human non-small cell lung cancer.docxVIP

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2018-05-30 发布于上海
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钙池操纵性钙内流及其功能蛋白trpc orai和stim1在人非小细胞肺癌中的表达研究-expression of controlled calcium influx in calcium pool and its functional proteins trpc orai and stim 1 in human non-small cell lung cancer.docx

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钙池操纵性钙内流及其功能蛋白trpc orai和stim1在人非小细胞肺癌中的表达研究-expression of controlled calcium influx in calcium pool and its functional proteins trpc orai and stim 1 in human non-small cell lung cancer

酸和尼非地平的无钙生理盐溶液灌洗细胞后，通过监测灌洗液中钙浓度恢复所引起的细胞内钙浓度的增加对 SOCE 进行评估。【结果】：1. 在已知的七个 TRPC 家族成员中，人 NSCLC 组织选择性表达 TRPC1 、 TRPC3 、 TRPC4 和 TRPC6 mRNA ，它们的相对表达丰度为 TRPC1≈TRPC6TRPC3TRPC4；不表达 TRPC2、TRPC5 和 TRPC7 mRNA。2. 与正常肺组织相比，各 TRPC mRNA 在肺癌组织中的表达水平呈现降低趋势，其中 TRPC6 mRNA 表达的降低具有统计学意义(P=0.009)。3. 肺癌细胞主要表达 TRPC1 和/或 TRPC6 mRNA，低表达 TRPC3 和 TRPC4 mRNA，不表达 TRPC2、 TRPC5 和 TRPC7 mRNA。4. 蛋白质免疫印迹对 NSCLC 组织和细胞中高丰度表达的 TRPC1 和 TRPC6 mRNA 进行蛋白水平验证，发现 NSCLC 组织和细胞中均表达 TRPC1 和 TRPC6 通道蛋白，在 NSCLC 组织中 TRPC6 蛋白表达水平明显低于远癌正常肺组织(P=0.03)，TRPC1 的表达与正常对照相比无差异。5. NSCLC 组织表达 ORAI1、ORAI2 和 ORAI3 以及 STIM1 mRNA，与正常肺组织相比呈上调趋势，统计上无差异。6. 荧光显微镜钙测定系统在肺癌细胞系和原代肺癌细胞中均检测到 SOCE 的存在。【结论】：本研究证明人肺癌细胞存在 SOCE。人 NSCLC 组织选择性表达 TRPC1、 TRPC3、TRPC4 和 TRPC6,主要表达 TRPC1 和 TRPC6；NSCLC 组织表达所有 ORAI 家族成员（ORAI1、ORAI2 和 ORAI3），并表达 STIM1；它们在构成 NSCLC 细胞中 SOCC、介导产生 SOCE，以及在肺癌发病中的作用有待进一步研究。 TRPC6 在 NSCLC 组织中相对于正常肺组织的低表达提示它可能作为肺癌的一种新型分子标志物。【关键词】：非小细胞肺癌，钙池操纵性钙内流，钙池操纵性钙通道，瞬时受体电位通道蛋白，钙释放激活钙调节蛋白，基质相互作用分子 1Expression of store-operated calcium entry and its functional proteins TRPC, ORAI and STIM1 in non-small cell lung cancerPostgraduate:Zhang QiTutor: He JianXing/Lu WenJuAbstractBACKGROUND: Lung cancer, which appears the highest morbidity and mortality among all human tumor types, is one of the leading diseases harmful to human health. Futher study on the pathogenetic mechanim of lung cander is needed to establish novel diagnostic or treatment strategies for this lethal disease. Calcium is an important messenger mediating various cellular activities such as proliferation, differentiation, and gene transcription. Calcium influx through store-operated calcium channels (SOCC), termed calcium store-operated calcium influx (SOCE), is an important approach regulating the cytoplasmic concentration of calcium. SOCC are thought to be constituted by the transient receptor potential canonical (TRPC) and store-operatedCa2+-release-actived Ca2+ channel (CRAC/ORAI) family members including TRPC1-7 and ORAI 1-3. Stromal-interacting molecules, i.e., STIM1 p