bacillussubtilissqr9的黄瓜促生和枯萎病生防效果及其作用机制研究.pdfVIP

摘要 Bacillussubtilis SQR9的黄瓜促生和枯萎病生防效果及 其作用机制研究 摘要 黄瓜是世界重要蔬菜之一，具有极高的经济价值，但是由于长期连作，黄瓜产生 严重的连作障碍问题。特别是黄瓜枯萎病，已严重威胁到黄瓜生产．然而，对黄瓜枯 萎病的防治目前尚无理想的化学药剂和抗病品种，一些栽培管理措施也只能起到局部 的控制作用，因此加强该病的防治迫在眉睫，生物防治作为综合防治黄瓜枯萎病的措 施之一，对生态平衡和可持续农业的发展具有特别重要的意义． 基于本实验室已经筛选出的2株高效拮抗菌株，哈茨木霉T37和枯草芽孢杆菌 fertilizer，OF)载体中进行二次固体发酵， SQR9，将其接种于合适的有机肥(organic fertilizer，BIO)．本试验研究结果如下： 获得新型微生物有机肥(bio-organic (1)盆栽试验研究了以这两株拮抗茵制成的三种BIo对黄瓜生长以及对枯萎病防 治的影响．结果表明：施用BIO处理均不同程度地降低了黄瓜枯萎病的发病率，施用 BIOII[后发病率降至13．73％，而对照发病率为100％。BIOI、BIOⅡ和BIOIH处理均能 显著提高黄瓜生物量，分别是对照的2．55、2．46和2．58倍．荧光定量PCR(real．timePCR) 测定黄瓜根际尖孢镰刀菌数量的结果表明，施用BIOII和BIOIII能够将病原菌数量控 制在103 copiesg-1土，而对照土壤高达107copiesg‘1土．定殖实验结果也显示菌株SQR9 和T37均能在黄瓜根系表面很好定殖，抢占生态位点，保证其拮抗功能的实现． (2)通过促生盆栽试验，研究了SQR9对植株生长情况的影响．试验结果表明： 加入sQR9茵液能够有效地促进黄瓜生长；处理1、2、3的地上部株高分别为CK的1．46、 2．2l和2．30倍，根系长度分别比CK增加了26％、54％、77％． (3)茵株SQR9发酵液经过酸沉淀、甲醇浸提等步骤得到脂肽化合物的粗提物， 通过平板对峙实验发现粗提物对病原茵菌落生长的抑制率为68．2％；用高效液相色谱 (HPLC)从粗提物中分离出五种脂肽类物质，发现这五种物质都有拮抗活性；利用 液质联用仪测定菌株SQR9部分抗茵物质的分子量，推测SQR9的抗茵物质中含有 Fengycin和BaeillomycinD这两种脂肽类物质：通过PCR检测发现SQR9基因组中含 D这两种物质的部分基因片段．用高效液相色谱从SQR9 有Fengycin和Baeillomycin 发酵液中分离到植物激素认A和赤霉素，其中IAA的产量为52．03 mg／L；通过分隔 平板培养法，发现SQR9能产生挥发性物质，促进拟南芥生长． Bacillussubtilis SQP．9的黄瓜促生和枯萎病生防效果及其作用机制研究 综上所述，施用BIO在降低黄瓜枯萎病发病率、控制尖孢镰刀茵的数量和促进黄 瓜生长等方面都具有显著效果．sQR9和T37均能在黄瓜根表很好定殖并形成生物膜， 保证其拮抗功能的实现． 关键词：黄瓜枯萎病；哈茨木霉；枯草芽孢杆菌；定殖；HPLC．ESI．MS；脂肽 Ⅱ ABSTRACT CUCUMBERGROWTHPROMOTIONANDWILTDISEASE THEIR SUPPRESSl0NOFBACILLUSSUBTILISAND SQl王9 MECHANISMS ABSTRACT i