微生物发酵工程课件第12篇 章 分离工程.ppt

第十二章 生物物质分离与纯化(Separation and Purification);一．基本概念： 1. 上游过程和下游过程 生产过程中一般将微生物发酵、酶反应过程或动植物细胞大量培养称为“上游过程”， 而与之相应的产物回收、粗分离、纯化及加工等后续过程就称之为“下游过程”，或称 之为生化分离和纯化过程。众所周知，要使生物技术走向产业化，必须要上下游过程兼容、协调，以使全过程能优化进行。 2. 生化产品的特点 ① 目的产物在初始物料中的含量低； ② 合目的产物的初始物料组成复杂，除了产物外，还含有大量的细胞、代谢物、残留培养基、无机盐等 ③ 生物活性物质稳定性差，对pH、温度、金属离子、有机溶剂、剪切力、表面张力等敏感，易失活变性 ④ 生化产品种类繁多，包括了大、中、小分子量的结构和性质复杂又各异的生物活性物质； ⑤ 生化产品的应用面广，许多产品用作医药、食品、试剂等，对含量和纯度要求高。 ;3. 用于后处理的分离纯化技术需满足的要求 （1）条件温和，特别对具有生物活性的物质，在后处理过程中必须保持其生物活性； （2）分高纯化技术的选择性好、专一性强，能从复杂的混合物中有效地将目的产物分离出来，以达 到较高的分离纯化倍数； （3）目的产物的量和活性具有较高的收率； （4）在提高单个分离技术的效率的同时，注意各单元操作间的有效组合和整体协调，以减少工艺过 程的步骤； （5）快速, 提高生产能力。; 4．后处理所占的比例（重要性） 研究开发中，后处理过程等的研究费用约占全部费用的50％以上； 产品的成本构成中，后处理成本占总成本的40％一80％； 精细和药用的产品，生产过程中后处理投入70％－90％； 生物产品的后处理分离纯化技术和工艺不仅影响产品的质量和成本，也决定着产品的产量。 产品由于无适当分离和纯化方法或因回收率太低致成本过高，而不能投产的例子是屡见不鲜的。 5．产品特性和要求决定分离纯化过程 如从发酵液中提取和精制菌体和胞内酶，就与分离与纯化细胞的代谢产物有明显的不同； 一般来说，分高纯???路线都包括了两个基本阶段：① 产物的初级分离阶段；②产物的纯化精制阶段 初级分离阶段在细胞培养结束之后，其任务是分离细胞和培养液、破碎细胞释放产物（如果产物 在胞内）、溶解包涵体、复原蛋白质、浓缩产物和去除大部分杂质等。 纯化精制阶段是在初级分离的基础上，用各种高选择性的手段和方法，将目标产物 和干扰杂质尽可能地分开，使产物的纯度达到相关的要求，成为各种级别的产品。 ;生物产品分离纯化的一般步骤;3. 蛋白质的去除 除去菌体细胞和悬浮固体物质之后的处理液中仍有一些可溶性的蛋白质残留．这些残留的蛋白质会对分离纯化产生很大的影响，如在溶媒提取时会产牛严重的乳化，在离子交换提取时，会严重影响树脂的吸附量等，必须在预处理时设法除去。 4. 重金属离子的去除 重金属离子的存在不仅会严重影响生物物质对的分离和纯化的操作，还会直接影响生物产品的质量和生产过程的收率，也是必须予以除去的。 5. 色素、热原质、毒性物质等有机物质的去除 对于抗生素、氨基酸、ATP、酶等药用生物产品，必须设法除去色素、热原质、毒性物质等有机物质。 6. 改善培养液的处理性能 改善培养液的处理性能的目的在于使分离和纯化过程能顺利进行。预处理时应尽可能使产物转入便于以后处理的相中。 7. 调节适宜的 pH和温度 预处理时调节适宜的PH和温度一方面使处理液适合分离纯化工艺的要求，另一方面保证产物的质量，尽量避免因pH、温度过高或过低而引起生物产品的生活损失。;培养液的固液分离 下表列出了固液分离过程常用技术及特点 ;序号; 管式离心机有GF、GQ两大系列，典型的如GQ系列澄清型管式离心机、GF系列液、液分离型管式离心机。 GF—分离型：主要用于分离各种难分离的乳浊液，特别适用于二相密度差甚微的液、液分离（比重差大于0.1%），以及含有少量杂质的液、液、固三相分离。 GQ—澄清型管式离心机，主要用于分离各种难于分离的悬浮液，特别是适合于浓度低、粘度大、固相颗粒细 、固液比重度差较小的固液分离。如：中药口服液的含糖量大、絮状物多、固相颗粒细且固液比重差较小等。;