第26次课_第6章酶的非水相催化.pptxVIP

观念的改变;观念的改变;非水溶剂（有机介质）中酶催化的研究;酶在有机介质中的催化的确立;为什么酶在有机溶剂中表现出催化活性？;第一节 酶非水相催化的研究概况;有机介质的酶催化;如多酚氧化酶催化酚类物质的氧化反应：;气相介质的酶催化;有优于液相反应的优点：某些酶在液相中使用受到一定的限制，如酶和辅酶的操作不稳定性，底物及产物的不溶性和酶的活性被产物抑制等，而气相中的反应就可以克服这些缺点，而且气相中的酶促反应更利于易挥发性产品的生产； Hwang 等研究了固定化醇氧化酶在气相中的催化反应;超临界流体介质中的酶催化;优点： 1)与水相比较，脂溶性反应物和产物可溶于超临界CO２中，而酶作为蛋白质不溶解，有利于三者的分离； 2)产品回收时，不需要处理大量的稀水溶液，可解决环境污染问题； 3)与有机溶剂体系相比，CO２无毒，不燃烧、廉价、无有机溶剂残留之虞； 4)CO２超临界体系具有气体的高扩散系数、低粘度和低表面张力使底物向酶的传质速度加快从而使反应速度提高，且在临界点附近，溶解能力和介电常数对温度和压力敏感，故反应速度提高。亦可以控制反应速率和反应平衡； 5)可简化产物的分离，有可能将反应和分离过程耦合。 已对10多种酶反应进行了研究，主要是酯化反应、酯交换反应、酯水解反应和氧化反应。反应条件温和，反应温度低于50℃;离子液介质中的酶催化;总 结;第二节有机介质中水和有机溶剂对酶催化反应的影响;1、微水介质体系； 2、与水溶性有机溶剂组成的均一体系； 3、与水不溶性有机溶剂组成的两相或多相体系； 4、（正）胶束体系； 5、反胶束体系。;1、微水介质体系;2、与水溶性有机溶剂组成的均一体系;3、与水不溶性有机溶剂组成的两相或多相体系;4、（正）胶束体系;5、反相胶束体系;不同类型的酶在反相胶束中的排布模型;二、水对有机介质中酶催化的影响;水的影响;水的影响;1、水对酶分子空间构象的影响;;2.水对酶催化反应速度的影响 ;有机溶剂中 酶含水量最适水量，酶构象过于“刚性”而失活； 有机溶剂中 酶含水量最适水量，酶构象过于“柔性”，因变构而失活； 最适水??：蛋白质结构的动力学刚性和热力学稳定性之间的最佳点平衡点，酶活性最大，保证酶的极性部位水合，表现酶活力所必需 同一种酶，反应系统的最适水量与有机溶剂的种类、酶的纯度、固定化酶的载体性质核修饰性质有关;有机介质中含两类水：结合水、游离水； 在结合水不变的条件下，体系含水量的变化对酶催化活性影响不大； 然而在一些体系中，溶剂和底物性质对酶活力也有直接或间接影响； 为了排除溶剂对最适含水量的影响，Halling建议用水活度（aw）描述有机介质中酶催化活力与水的关系： 水活度：体系中水的逸度与纯水逸度之比； 用体系中水蒸汽压与相同条件下纯水蒸汽压之比表示； Aw=P/Po P：一定条件下体系中水的蒸汽压 Po:相同条件下纯水的蒸汽压 水活度与溶剂极性大小无关，最适含水量与溶剂极性成正比，故采用水活度作参数更确切；;三 有机溶剂对有机介质中酶催化的影响;有机溶剂影响;1. 有机溶剂对酶结构与功能的影响;（1）由于酶分子与溶剂的直接接触，蛋白质分子表面结构发生不可忽视的变化； （2）通过减少整个活性中心的数量，溶剂对酶的活性中心产生影响，活性中心数目丧失的多少取决于溶剂中的疏水性大小。 Why？溶剂与底物竞争酶的活性中心结合位点，溶剂为非极性，影响更明显，溶剂分子能渗透入酶的活性中心，降低活性中心的极性，增加酶与底物的静电斥力。;（1）有机溶剂对结合水的影响;（2）溶剂属性(极性)与酶活力的定量关系;３、溶剂对底物和产物分配的影响;第三节 酶在有机介质中的催化特性;一、底物专一性;底物专一性(续);二、对映体选择性（enantioselectivity);有机溶剂中酶对底物的对映体选择性由于介质的亲(疏)水性的变化而发生改变。 酶在水溶液中立体选择性强，疏水性强的有机溶剂中的酶的立体选择性差。 这种选择性是由底物的两种对映体把水分子从酶分子疏水结合位置换出来的能力不同； 介质的疏水性加大，L型底物置换水的过程在热力学上不利。;溶剂的几何形状也影响酶的对映体选择性，如Ottolina报道一些脂肪酶、蛋白酶在（R）-香芹酮及（S）-香芹酮中立体选择性不同； 对映体选择性意义： 蛋白酶在水溶液中对L-氨基酸起作用，而在有机介质中可用D-氨基酸为底物合成手性药物，有重要应用。;三、区域选择性（regioselectivity） ;（kcat/Km ）1/（kcat/Km ）2与溶剂的疏水性相关;四、键选择性（chemoselectivity);Tawaki等人发现反应介质对某些氨基醇的丁酰化的化学键选择性（O-酰