《灭菌技术问题》课件.pptVIP

The End 掌 握 常见灭菌方法和原理 试验室和工业发酵操作 染菌的防治 * * 间歇灭菌 2.培养基间歇灭菌 又称分批灭菌，是将配制好的培养基和所有设备一起 进行灭菌的操作，也称实罐灭菌。 特点 是不需其他的附属设备，操作简便，国内外常用。 缺点是加热和冷却时间较长，营养成分有损失，罐利用低。 为中小型生产企业采用。 分批灭菌过程 升温、保温和降温，灭菌主要是在保温过程中实现的，在升温的后期和冷却的初期，培养基的温度很高，因而对灭菌也有一定贡献。 T 灭菌温度 to t1 t2 t3 time N1 N2 N 升温 保温 降温 N0 Ln(N0 / N1) Ln(N2 / N) Ln(N1 / N2) 要求绝对的无菌在工业上很难做到，因为由对数残存律可知： N=0， t=∞ 。因此，绝对的无菌很难做到。 设计中常采用N＝0.001（1000次灭菌中有一次失败） 间歇灭菌的升温阶段和降温阶段对灭菌的贡献相对较小， 而对培养基中维生素类物质的破坏作用则可能很严重。 应尽量缩短提温和降温阶段。 生产中一般采取121℃维持30min的方法。 3.培养基连续灭菌 连续灭菌时，培养基能在短时间内加热到保温温度并能 很快被冷却，因此，与分批灭菌相比，可在更高的温度 下灭菌，而保温时间则很短，有利于减少营养物质的破坏。 其它常用的除菌方法 膜过滤除菌 是通过机械作用滤去液体或气体中细菌的方法。根据不同的需要选用不同的滤器和滤板材料。 微孔滤膜过滤器是由上下二个分别具有出口和入口连接装置的塑料盖盒组成，出口处可连接针头，人口处可连接针筒，使用时将滤膜装入两塑料盖盒之间，旋紧盖盒，当溶液从针筒注入滤器时，此滤器将各种微生物阻留在微孔滤膜上面，从而达到除菌的目的。根据待除菌溶液量的多少，可选用不同大小的滤器。 此法除菌的最大优点是可以不破坏溶液中各种物质的化学成分，但由于滤量有限，所以一般只适用于实验室中小量溶液的过滤除菌。 第三节 空气的灭菌 需氧微生物在发酵过程中需要耗用氧气，氧气通常由空气提供。因此，在纯培养过程中，空气的除菌是需氧发酵的重要环节。 1.空气除菌的方法 热杀菌法 理论上讲，空气灭菌可以采用加热的方法。但空气用量很大，且空气的传热效果较差。所以，用蒸汽加热灭菌是不合理的。 过滤除菌法 是让含菌空气通过过滤介质，以阻截所含的微生物，而获得无菌空气。该方法是工业中常用的方法。 过滤除菌可分为绝对过滤和深层过滤。 其它方法 辐射法、化学法、静电除菌法。一般只限于实验室使用。 2.空气过滤除菌的原理 深层过滤所用的介质间歇一般大于固体颗粒。那么，空气中的菌体如何被除去呢？ 是依靠气流通过滤层时，基于滤层纤维网格的层层阻碍，迫使气流不断改变气速大小和方向，使菌体与滤层纤维间发生惯性撞击、拦截滞留、布朗扩散、重力沉降和静电吸附等作用，来达到过滤除菌的目的。 3.空气过滤的对数穿透定律 空气过滤时，微粒在滤层内的减少速率，正比于微粒的浓度，即： 式中：dN/dl－通过单位滤层厚度时，菌体数的减少； k－阻塞因数（1/cm或1/m）。 积分上式得： 4.常用的过滤介质 棉花 玻璃纤维 活性碳 超细玻璃纤维纸 烧结材料过滤介质 新型过滤介质 如超滤膜 5.空气过滤流程 a.高空采风、两次冷却、两次分油水、适当加热流程 特点 ：两次冷却、两次分油水、适当加热。空气第一次冷却到30～35℃，第二级冷却至20～25℃，经分水后加热到30～35℃，因为温度升高，相对湿度下降。 b.冷热空气直接混合式空气除菌流程 特点 ：省去一级冷却和分离设备及空气再加热设备，简化了流程，使冷却水用量也降低了。压缩空气从贮罐出来分两路，一部分进冷却器，经分离器分离水、油雾后与另一部分未处理过的高温压缩空气混合，使混合后的空气温度为30～35℃，相对湿度为50～60%。 第四节 工业相关灭菌技术 反应器的灭菌操作是生化反应过程重要的技术环节。灭菌不彻底会造成染菌，给生产带来严重危害，防止杂菌污染是任何发酵工厂的一项重要工作内容。尤其是无菌程度要求高的液体深层发酵，污染防止工作的重要性更为突出。 所谓“杂菌”， 是指在发酵培养中侵入了有碍生产的其他微生物。几乎所有的发酵工业，都有可能遭受杂菌的污染。染菌的结果，轻者影响产量或产品质量，重者可能导致倒罐，甚至停产。 发酵反应器的灭菌 染菌的防治 染菌原因 百分率，% 外界带入杂菌（取样、补料带入） 8.20 设备穿孔