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三、RNA分子的结构与功能 ① 单链结构，碱基组成为A、G、C、U等，稀有碱基或修饰碱基较多，稳定性较差，易水解。 ② 单链自身回折，碱基互补（A＝U，G≡C）形成局部双螺旋，非互补区形成突环，称“茎环”结构或发夹结构。 ③ RNA同样要形成高级结构时才能发挥活性。 参与蛋白质合成的RNA 核糖体RNA rRNA（ribosome RNA） 信使RNA mRNA（messenger RNA） 转运RNA tRNA（transfer RNA） RNA的结构特点： 第31页/共47页 （一）mRNA mRNA的功能是将细胞核中基因信息转录后携带出来，作为指导蛋白质生物合成的直接模板。 真核细胞生物的mRNA是由其前体核不均一RNA（hnRNA）剪接而成。 真核细胞成熟mRNA的结构特点： （1）5ˊ端帽子结构：5ˊ-末端在成熟过程中会加上7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸（m7Gppp），称为“帽子”结构。该结构与mRNA的稳定性有关，并与其转运出细胞核、与核糖体结合以及与蛋白质生物合成的起始等过程都有一定的关系。（2）3ˊ端多聚腺苷酸尾部：3ˊ-末端有一段20～200个腺苷酸的多聚腺苷酸尾部（poly A），与mRNA的稳定性和转运出细胞核的过程等有关。 第32页/共47页 （二）tRNA tRNA的主要功能是携带蛋白质合成所需的氨基酸，并按mRNA上的密码顺序“对号入座”地将其定位于多肽链上。 基本结构具有下列共同特点： ①是三种RNA分子中最小的一类，由70～90个核苷酸组成一条单链； ②是含稀有碱基最多的核酸，一般每分子含有7～15个。如二氢尿嘧啶（DHU）、胸腺嘧啶（T）、假尿嘧啶（ψ）、次黄嘌呤（I）等； ③其5ˊ端大多为pG ，3ˊ端全都是CCA-OH； ④碱基组成具有保守性，所有tRNA分子中约有30%的碱基固定不变。 第33页/共47页 1 2 4 “叶子” 反密码子 运载氨基酸 氨基酸臂 RNA中的碱基配对原则 A-U G-C 3 可变环(额外环) D环(二氢尿嘧啶环) 不同的tRNA具有不同的额外环，所以额外环是tRNA分类的重要指标 TψC环 (胸苷假尿苷环) 反密码子环 tRNA三叶草型二级结构 第34页/共47页 氨基酸臂与反密码环分别位于“倒L”型分子的两端，DHU环与TψC环位于拐角上。 主要依靠碱基堆积力和氢键维系，紧凑而稳定。 tRNA的三级结构 第35页/共47页 （三）rRNA rRNA的功能： 与多种核糖体蛋白组成核糖（ribosome），提供蛋白质生物合成的场所。 核糖体由大小不同的两个亚基所组成。rRNA是构成核糖体大、小亚基的骨架，决定着整个复合体的结构以及蛋白质组分所附着的位置 。 第36页/共47页 核蛋白体的组成 第37页/共47页 项目 RNA DNA 特征碱基 U T 稀有碱基 多见 极少见 碱基含量 无一定规律 A=T；G=C 碱基配对 A与U；G与C 部分配对 A与T；G与C 全部配对 分子大小 大小不等，含数十至数千个核苷酸 一般比RNA大得多 结构特点 单链 互补双链 主要功能 参与遗传信息表达 储存遗传信息 RNA和DNA的比较 第38页/共47页 一、核酸的分子大小、粘度、溶解性、酸碱性质 第3节 核酸的理化性质 ① DNA分子量约106～1011D，RNA分子量约102～106D。 ② 线性大分子，粘度高但抗剪切力差。 ③ DNA为白色纤维状固体，RNA为白色粉末，均微溶 于水，不溶于有机溶剂。 RNA易溶于低盐（0.14mol/LNaCl）溶液。 DNA易溶于高盐（1mol/LNaCl）溶液。 ④ 核酸属于两性解离物质，具有等电点（pI为2～ 3），一般呈酸性（在中性溶液中带负电荷）。 第39页/共47页 二、核酸的紫外吸收 嘌呤碱和嘧啶碱分子中具有共轭双键，因此核酸具有紫外吸收的特征，最大吸收峰波长为260nm。 利用此特性，可采用紫外分光光度法进行核酸的定性定量分析，也可借此鉴别核酸检品中的蛋白质杂质。 第40页/共47页 在一定理化因素作用下，DNA双螺旋结构中碱基之间的氢键断裂，变成单链的现象称为DNA变性 在适当的条件下，两条互补单链重新结合并恢复天然的双螺旋结构，称为复性（renaturation） 热变性的DNA缓慢冷却后复性称为退火。 增色效应：当核酸变性或降解时260nm处光吸收值显著增加的现象。 减色效应：核酸复性后，260nm处光吸收值又恢复到原有水平的现象。 加热变性时DNA溶液A260升高达到最大值一半时即DNA解链50%时的温度称为该D