病毒和亚病毒刘.pptxVIP

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病毒和亚病毒刘

人类对病毒的发现和认识过程;1935:美国 斯坛莱 从烟草花叶病病叶中提取出了病毒结晶,又证实了结晶中含核酸和蛋白质两种成分,而只有核酸具感染和复制能力,并因此获诺贝尔奖。 1952:Hershey和Chase证实噬菌体的遗传物质仅仅是DNA,开创了病毒分子生物学。 1971后:陆续发现了各种亚病毒——类病毒、朊病毒、和拟病毒。;病毒的基本类型;定义和特点?;根据病毒的分布(宿主)类群分: 人体病毒: SARs病毒、乙肝病毒、流感病毒、人类免疫缺陷性病毒 动物病毒:口蹄疫病毒、腺病毒、鸡瘟病毒、狂犬病毒 植物病毒:烟草花叶病毒、郁金香花叶病毒 真菌病毒: 细菌(放线菌)病毒——(噬菌体):大肠杆菌T系噬菌体 根据核酸类型 DNA病毒 RNA病毒;? ;一、病毒的形态构造和化学组分;(一)病毒的大小;牛痘病毒;(二)病毒的形态;病毒的形态;1.典型病毒粒的构造;;2.病毒粒子对称体制;a、螺旋状对称型:烟草花叶病毒(TMV) 呈直杆状,长300nm,宽15nm,中空内径4nm,由158个 氨基酸组成一个皮鞋状的衣壳粒,相对分子量为17500,总共 2130个衣壳粒,排列成130圈螺旋,核酸核心是单链的RNA, 相对分子质量为260万,含有6390个核苷酸,每3个核苷酸与 一个衣壳粒相结合,盘绕于蛋白质的中空内径中。 ; 二十面体具有12个角、20个面 和30条棱。腺病毒 的衣壳是典型的二十面体对称, 由252个衣壳粒组成,没 有包膜。腺病毒的核心是由线状双链DNA构成的。 其基因组的大小都 约为36500个核苷酸对。 ; T4由头部(核心是双链线状DNA)、颈部和尾部(尾鞘、尾管、基板、刺突和尾丝)三个部分构成。;3.病毒的群体形态;包涵体;噬菌斑;噬菌斑的形态;病斑:单层动物细胞受肿瘤病毒感染,导致细胞剧增,类似于菌落的病灶。 空斑:由动物病毒感染而造成的单层动物细胞上类似于噬菌斑的空白斑。 枯斑:是植物病毒群体。 ;枯斑;(三)病毒化学组成——蛋白质与核酸;2、病毒的核酸(病毒基因组Genome);二、4类病毒及其繁殖方式;Frederick W. Twort (1877-1950) 1915年,首次发现菌落上有透 明斑出现 ;噬菌体(phage):是侵染原核生物(细菌、放线菌和蓝细菌)的病毒。 个??极小,直径在十几到几十纳米不等,电镜可见,大部分呈蝌蚪状;此外还有球状和丝状。 无细胞结构,仅由蛋白质构成的衣壳和包含于其中的核酸组成; 只能寄生在活的微生物细胞内,这种寄生具有高度的专一性。 ;噬菌体的形态结构; 由于绝大多数噬菌体为蝌蚪形,呈蝌蚪形的三种大肠杆菌T偶数噬菌体(E.coliT 2 、T 4 、T 6 )是病毒学和分子遗传学研究的最好材料,尤其是对T 4 噬菌体的了解更为深刻,人们早就获得其清晰的电子显微镜照片和完整的基因组图谱。现以E.coli T 4 为例介绍典型的蝌蚪形噬菌体的基本结构(图2-63);大肠杆菌T4 噬菌体由头部、颈部和尾部三个部分组成: ;噬菌体的模式图;1.噬菌体的生长繁殖方式;噬菌体繁殖的五个阶段:以E. coli的T偶数噬菌体为例 吸附 侵入 增殖 成熟 (装配) 裂解 (释放);吸附(adsorption); 感染复数(multiplicity of infection, MOI ) 每一宿主细胞所能吸附的相应噬菌体的数量,可达250~360。 自外裂解(lysis from without) 由于超感染复数的外源噬菌体吸附而引起的,不能产生子代噬菌体的裂解。(思考:为什么超感染复数的外源噬菌体吸附会引起自外裂解?);;侵入(injection);增殖(replication);噬菌体核酸的复制和蛋白质合成方式(难点);早期基因;成熟(装配);裂解(释放);吸附 侵入 增殖 成熟 (装配) 裂解 (释放) ;噬菌斑;噬菌体效价的测定方法;;单层平板法与双层平板法比较; 双层平板法与电镜计数比较 前者是计有感染力的噬菌体粒子,后者是计噬菌体的总数。 用双层平板法测出的效价比用电镜直接记数得到的效价低。 成斑率=根据噬菌斑测定出的效价和用电镜记数得到的效价之比;3. 噬菌体的一步生长曲线; 测定一步生长曲线的步骤 噬菌体稀释液加到高浓度宿主细胞中,保证每个细胞最多不超过一个噬菌体吸附 用噬菌体抗血清中和尚未被吸附的噬菌体 用培养液稀释混合液,并中止抗血清作用,室温培养 间断取样进行效价测定,得一曲线;T4噬菌体的一步生长曲线;一步生长曲线;裂解

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